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【讨论】清洗后泵压不稳

greencut

2009/11/23

液相色谱（LC）

上周用缓冲盐和乙氰做流动相分析样品后清洗，发现压力上升至管柱压力上限，随后用四氢呋喃和乙氰（6：4）反冲Column 60min，再顺冲30min，继续用水冲20min，最后用乙氰冲30min，此时压力稳定在5.3MPa，现在系统平衡后还是用缓冲盐和乙氰做流动相，但压力由5.3MPA升到管柱压力上限20Mpa，报警！请问大家这是什么原因？
注：用甲醇和乙氰做流动相压力稳定在5.3Mpa，而用缓冲盐和乙氰就会发生以上现象！

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ymeteor

第1楼2009/11/25

1. 确认纯有机相转换到缓冲盐流动相（包括缓冲盐流动相转换到纯有机相）的过程中需要10%甲醇水溶液过渡30min
2. 如果不用走梯度，最好将缓冲盐和乙腈手动混合。因为走纯乙腈的泵单向阀容易因乙腈输送产生的电荷导致单向性不好
3. 如果色谱柱不是旧色谱柱，最好不要反向冲洗，除非色谱柱说明书中明确说明可以反冲

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