【讨论】梯度洗脱的问题

很值得讨论的问题！个人认为两种情况情况可能都存在。

要按照梯度条件走，有些物质用水相多的可以带出，有些只能用有机相多的带出，要看物质的性质！

应助达人

有可能，不信你就试验下，用20%乙腈走了一个小时后换用乙腈走下，你会发现一下洗出一堆东西来的。

看什么试样，有的是会出现如3楼说的情况的

应助达人

既然设置了梯度,那就是有在等度下分离度不好和洗脱不完全的.

没有永远洗不出来东西，只是洗出来的东西是什么样的区别。

时间长了也能洗脱出来的，可能24h，或者N天。。。

这个问题涉及到色谱的实质——特定组分在两相间的分配行为，理论上说，没有一种成分会100%的被吸附在固定相，所以如6、7楼所说，它终会被洗出的。但是组分在两相的分配系数与流动相配比（本例中是乙腈浓度）之间并非线性关系，所以20%条件下的洗脱时间并非40%下洗脱时间的2倍，而是大约10多倍左右。这样一来即便可以洗出，由于纵向扩散的缘故峰已经太宽了，看上去就是个平缓的波，没有定量意义了。

很可能就一直走不出来，具体要看你的样品的。我以前试过。有一次手下的往了按梯度的“开始”键，进了一夜的样，一个主峰都没出，后来白天拿乙腈冲，冲出了N个峰。