【求助】求助：调整流动相的比例相关问题！

时间变化这么大？
你怎么就肯定2.5min出峰的那个就是你要检测的物质？

2.5min太快了吧!!要把它往后延才好!!

应助达人

两次肯定有一次做的有问题，很确定一下到底哪次做的出来的峰才是对的，第一次的未必正确，换台仪器，与其它文献比较，看看哪个才是合理的。流动相的组成是什么样的。

药典里已有标准方法，为什么要自己再建立？

流速应该是没有问题，因为测试了同时在研究的其他药物，色谱行为正常。
换了柱子试过，还是一样的问题。

随着样品浓度的不同，峰面积不一样啊。而空白也没用这个峰。

其他药物色谱行为正常，请问流动相比例一样吗？要是不一样，可以肯定的说，是水相的比例非人为的发生变化！

如果你这个问题一直是这样，包括更换柱子后，过一段时间你的出峰时间有提前。我猜可能是你的柱子上的固定相和你的样品中一些物质发生反应，到了一定程度时候，柱子性质发生变化，所以保留时间发生变化了！

用新配的流动相做做，有的时候流动相用久了估计会出问题的

会不会是稳定性的问题。每次都是新制的样品溶液吗？
2.5min会不会是杂质峰，或是分解产物的峰？

因为之前做了一个星期的液相，对测定方法做了方法学验证的。所以觉得第一次的应该是没有问题的，而且现在调节流动相的比例，保留时间不移动。

欧冠+世界杯(xky0230699) 发表:两次肯定有一次做的有问题，很确定一下到底哪次做的出来的峰才是对的，第一次的未必正确，换台仪器，与其它文献比较，看看哪个才是合理的。流动相的组成是什么样的。

药典里已有标准方法，为什么要自己再建立？