【讨论】枸橼酸离子测定法的讨论

第二法高效液相色谱法

照高效液相色谱法（附录Ⅲ B）测定。

色谱条件 用苯乙烯-二乙烯基苯共聚物为基质的阳离子交换色谱柱（H+），粒度9μm或8μm，内径7.8mm，柱长300mm；柱温为50℃；流动相为0.004mol/L硫酸溶液，流速为每分钟0.8ml，示差折光检测器。

测定法 精密称取经减压干燥至恒重的枸橼酸钠（C6H5Na3O7·2H2O）0.735g，置100ml量瓶中，用水溶解并稀释至刻度，精密量取5.0ml、10.0ml、15.0ml，分别置25ml量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，即得相对应的5.0mmol/L、10.0mmol/L、15.0mmol/L枸橼酸离子对照品溶液。分别精密量取20μl，注入液相色谱仪，记录色谱图；另精密量取供试品溶液1ml，置15 ml离心管中，精密加1.5%磺基水杨酸溶液1ml，混匀。室温下以每分钟2000转离心10分钟。取上清液，同法测定。

用对照品溶液的枸橼酸离子浓度对峰面积进行直线回归，求得回归方程，计算出供试品溶液枸橼酸钠含量(mmol/L)，再乘以供试品稀释倍数（2），计算出供试品枸橼酸离子含量（mmol/L）。

【附注】（1）根据供试品枸橼酸离子含量，可适当调整枸橼酸离子对照品溶液浓度。

（2）直线回归相关系数应不低于0.999。

（3）不同厂家的阳离子交换色谱柱（H+）的流速、流动相、柱温等会有所不同，可根据色谱柱说明书对色谱条件进行适当调整。



2005版药典已经有了前两法，为什么还要增加第三法 （反相HPLC ）呢？

应助达人

应该是三个方法各有优缺点，适用于不同的范围，第一法明显前处理麻烦，但有些样品可能就得这么处理。第二法的色谱柱成本比较高。不知道第三法的具体内容是什么？用反相还成本就要低很多了，根据样品性质和所要结果的准确程度选择不同的方法。

怎么没有大侠要补充点什么，大家一起学习哈。。。