HPLC谱总在变，这是怎么回事？

希望大家都能给想一想！！谢谢

不要管那么多，只要不影响测定峰就可以了，如果真要想的话很难说，样品的问题，柱的问题，仪器的问题等等等等。我曾经测定一个样品，全自动进样，同一针进了１０针（指纹图谱），出了１０个结果，不稳定，到现在国内很多地方也没有解决，老板让我解决，不给钱谁管他。柱子、仪器确定没有问题，可能与样品的ＰＨ，Ｔ有关，总之。头痛。

感谢楼上的讲解！

具体方法，梯度？
会不会没回复到原来状态就又开始了？

确认一下是不是前一个样品有残留？

不会是残留的，我常是连续作同一个样，方法一致，洗脱时间一致，结果常不一致！即使真的有残留，应该不会使5-15处的峰消失吧！是不是PH的影响呢？

我用的0.1%TFA水--乙腈体系！
梯度：时间 乙腈 TFA水
0：00 5.0 95.0
20：00 30.0 70.0
40：00 100 0
50：00 100 0
55：00 5.0 95.0

我曾经每次都是梯度走完，我才开始下一个样，结果是变化的！
后来，走到40分后，往往停止，等到泵压恢复后，才做下一个样！同样，结果也是变化的！
总之应该不是回复到原来状态的问题吧！

你的样品用什么溶解的啊，有可能溶剂对他有干扰，你最好先扫一下溶剂

一个流程没有走完,第二针给赶出来了!