【求助】请教：关于血液中主药分离度的问题？

柱温70要这么高要求,做了几次估计柱子也会坏呀.
如果杂质多要用预柱处理或者前处理.
如果流动相中加酸了请在水相和有机相中都加,现在很多地方都习惯只在水里加酸,其实两个相都加就可以克服基线漂移,这个我亲身实践过,即使是乙腈如果不加的话也会出现漂移.
另外你的流动相比例有机相的起始比例太高,一般分析全血样品要用梯度洗脱更好.

样品处理过程如下：取全血1ml置于10ml,加一定量内标，加入NaOH溶液2ml,涡旋2min，加无水乙醚(重蒸）4ml,涡旋5min，3000转每分钟离心15分钟，取乙醚层40度水浴氮气吹干，加入酸化甲醇溶液（盐酸：甲醇=1：3）200微升重组，加正己烷0.5ml涡旋30秒，3000转每分钟离心10分钟，弃去正己烷层去下层清夜20微升进样。
大家看处理过程有什么问题？怎么优化？

怎么没谁给回答下？

1.关于分离度的问题，是不是考虑把水换成盐呢？
2.我记得原来的公司做狗血样品处理时，是取血后立即去离心，然后再样品处理的。

处理过程太复杂,重复性会很差;
我读研的时候也是做的兔全血,基本是取血后离心,取上清液即血清部分再用某种有机试剂处理一下,离心,就可以了,没有整得这么复杂.
你这个处理过程是按某种既定标准(如药典还是客户资料)处理的,还是自己想的?如果是自己想的,建议先看看类似文章再摸索实验条件,想当初我是看了不下100篇的文献的

主要是检测的主药在血浆跟血细胞里面都溶，大约各占50%吧 不稳定 所以只有测全血。处理过程是看了文献综合后的方法 大部分都是这么处理的，现在在尝试流动相中加入磷酸，三乙胺试下 能不能去杂质，实在不行跑梯度，这个波长基线是不是漂的厉害，固相萃取暂时没仪器做不了啊

固相萃取我有柱子但是没有仪器 ，还能怎么做?

分析的主药为多肽类抗生素，现在可以肯定试剂没有干扰，就是血样里的杂质，请大家帮忙！！

用洗耳球，加压固相小注上加个注射器，下面用试管等容器接着，上面用洗耳球加压，大体这样是比较简易的方法，你可以试试。

确实应该在样品处理上下些功夫，杂质多大体是处理的问题，当然色谱条件的改变可以分开是最好的。因为没做过此类药物，所以处理上没有更好的建议。用的提取试剂可以用个混合的试试，看看能否有些好转。

增加一个过滤，也是个好方法！我记得原来处理过鬼臼毒素，方法就是要求用固相小柱先处理，然后进液相的！