【求助】样品在C18柱上不保留

应助达人

多找找多肽高效液相色谱分离纯化方面的文献看看，找一个适合你的。

我最近也在做多肽？不过我做的是制备，中压制备，有空可以交流下？
企鹅：252449462

你多肽的分子量是多大，或者可以考虑打孔径的试试呢，而且C4做蛋白应用很多，可以加qq聊 906987756

说明你的多肽分子量比较小，亲水性很强的。建议用亲水的柱子试试看。

你下载一下这篇文章看看 ：蛋白质与多肽在反相色谱柱上色谱保留行为的比较研究

感谢你的回复。如果你能推荐亲水的柱子，感激不尽。我们实验室的液相是安捷伦的。

感谢你的回复。我正在寻找这篇文献。

感谢各位的热心回复。我做的这个多肽，分子量不大，可能不到一万，相关的中外文献最后分离手段都是C18反相色谱柱，梯度洗脱。但是到我这里，就行不通了，我不知道还可以用什么方法把他纯化出来。

另外，我想知道，安捷伦液相色谱没有配备自动收集器，如何手动收集组分？如何确定延迟时间或体积？有没有哪位详细的说明一下操作步骤。

上样前的平衡不能有B液，要纯水溶，并且体积尽量小；如果不行可以把TFA的浓度提高3-5倍。