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液相色谱保留时间不稳定

液相色谱(LC)

  • 实验室最近新购了一台安捷伦的液相色谱,走标准样品数针压力线很一致,保留时间却完全不一样,后面进的样保留时间都会靠前一些,大家帮忙解释一下这个现象会事什么原因导致的呀?我们使用的流动相是乙腈和纯水,仪器和溶剂都是新购的。
    听说液相色谱在流动相的维护方面尤其要注意,稍不注意就可以导致仪器工作不正常,各位有丰富经验的大侠请多多指点,本人液相色谱的经验很少,各位请不吝赐教~

    环境温度26度,柱温30度,流动相在线混合的。很纠结,今天上午又做了实验,保留时间又变成往后移了。
    在开始实验之前我们已经对每一个通路排气泡了,然后用乙腈清洗系统近一个小时,再调用检测方法平衡了1个小时,结果保留时间还是波动~
    谱图附后
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  • xizhi

    第1楼2011/12/01

    不知道你的偏差具体有多少,不过流动相里添加缓冲盐有助于稳定出峰时间,并且这可能也与你的样品溶解有关,溶解条件要尽量一致才能保证出峰的稳定

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  • 江海孤舟

    第2楼2011/12/01

    可能是平衡时间不够,
    或样品中含有其他影响保留时间的其他物质。

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  • zhaohua8011

    第3楼2011/12/01

    流动相是乙腈和纯水,色谱柱没有平衡好!看看仪器压力是否稳定!

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  • hyhy303

    第4楼2011/12/01

    6针压力线一致,能重合,保留时间往前移动,从第1针到第6针往前移动了1.5min左右!

    zhaohua8011(zhaohua8011) 发表:流动相是乙腈和纯水,色谱柱没有平衡好!看看仪器压力是否稳定!

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  • 八毛的老公

    第5楼2011/12/01

    保留时间是多少啊?完全不一致是多大的差别,我乙腈水流动相也经常用,没见过这种情况。

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  • hyhy303

    第6楼2011/12/01

    保留时间最大的偏差了1.5min,流动相乙腈和纯水,没有缓冲盐,我进的标准样品,溶剂也是乙腈,里面的溶质也单一。

    xizhi(xizhi) 发表:不知道你的偏差具体有多少,不过流动相里添加缓冲盐有助于稳定出峰时间,并且这可能也与你的样品溶解有关,溶解条件要尽量一致才能保证出峰的稳定

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  • hyhy303

    第7楼2011/12/01

    平衡了至少1个小时,看信号压力线稳定后才进样的。

    江海孤舟(zw0303) 发表:可能是平衡时间不够,
    或样品中含有其他影响保留时间的其他物质。

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  • xzliyanfang

    第8楼2011/12/01

    只用乙腈重新平衡一下柱子呢

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  • hyhy303

    第9楼2011/12/01

    保留时间前移了1.5min左右。
    请问每天早上放空、平衡要多长时间合适?我在排气泡的时候看到前端管路里有气流,但是却没有从purge阀下面的管路里流出来,这正常吗?

    八毛的老公(tamadejkl) 发表:保留时间是多少啊?完全不一致是多大的差别,我乙腈水流动相也经常用,没见过这种情况。

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  • sunjun0620

    第10楼2011/12/01

    样品最好用流动相定容,保留时间会稳定一些。

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