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乳粉中维生素C的检测

木子

2011/12/16

乳制品检测

乳粉中维生素C的检测：

维生素C:又名抗坏血酸，是一种水溶性维生素。

检测依据：GB5413.18-2010

检测原理：维生素C在活性炭存在下氧化成脱氢抗坏血酸，它与邻苯二铵反应生成荧光物质，于发射波长350nm，激发波长430nm用荧光光度计测定其荧光强度，其荧光强度与维生素C浓度成正比，外标法定量。

所需要的试剂：

1.实验用水均为去离子水2.偏磷酸—乙酸溶液：称取15g偏磷酸和40ml 36%乙酸于100ml水中，溶解后稀释至500ml备用。

2.偏磷酸—乙酸溶液：称取15g偏磷酸和40ml 36%乙酸于100ml水中，溶解后稀释至500ml备用。

3.酸性活性炭：80—120目，称取粉状活性炭约200g，加入1L 10%盐酸，加热至沸腾，真空过滤，取下结块于一个大烧杯中，用清水洗至滤液中无铁离子为止，在110℃~120℃烘箱中干燥约10小时后使用。

检验铁离子的方法：普鲁士蓝反应，将20g/L亚铁氰化钾与1%盐酸等量混合，将上述滤液滴入，如有铁离子则产生蓝色沉淀。

4.乙酸钠溶液：500g三水乙酸钠，并稀释至1L。

5.硼酸—乙酸钠：3g硼酸，用乙酸钠溶液（药品4）溶解并稀释至100ml，临用前配置。

6.邻苯二铵：40mg邻苯二铵，用睡溶解并稀释至100ml，临用前配制。

7.维生素C标准溶液（100ug/ml）：称取0.05g维生素C标准品，用偏磷酸—乙酸溶液溶解并定容至50ml，临用前配制。

样品处理：

1.称取5g乳粉试样，用偏磷酸—乙酸溶液溶解定容至100ml，定容至100ml

准确吸取10ml维生素C标准溶液用偏磷酸—乙酸溶液稀释并定容至100ml

2.将上述试样转至放有2g酸性活性炭的250ml三角烧瓶中，剧烈振荡过滤（弃去约5ml最初滤液），即为试样和标准溶液的滤液。

3.试样空白液：5ml硼酸—乙酸钠溶液（先加入到25ml容量瓶中） + 5ml滤液 → 于25ml容量瓶中

标准空白液：5ml硼酸—乙酸钠溶液（先加入到50ml容量瓶中） + 5ml标准溶液 → 于50ml容量瓶中

静止30min后，用蒸馏水定容至刻度

4.在此30min内，

试样溶液：5ml乙酸钠（先加入到25ml容量瓶中）+5ml滤液 → 于25ml容量瓶中

标准溶液：15ml水（先加入到50ml容量瓶中） +5ml标准溶液 → 于50ml容量瓶中

用水稀释至刻度

5.试样待测液：

2ml试样空白溶液 + 5ml邻苯二胺 → 于10ml试管中 → 摇匀、避光条件下放置60min待测

2ml试样溶液 + 5ml邻苯二铵 → 于10ml试管中 → 摇匀、避光条件下放置60min待测

6.标准系列待测液：

2ml标准空白溶液 + 5ml邻苯二胺 → 于10ml试管中 → 摇匀、避光条件下放置60min待测

0.5ml标准溶液 +1.5ml蒸馏水（补足至2ml）+ 5ml邻苯二胺 → 于10ml试管中 → 摇匀、避光条件下放置60min待测

1.0ml标准溶液 +1.0ml蒸馏水（补足至2ml）+ 5ml邻苯二胺 → 于10ml试管中 → 摇匀、避光条件下放置60min待测

1.5ml标准溶液 +0.5ml蒸馏水（补足至2ml）+ 5ml邻苯二胺 → 于10ml试管中 → 摇匀、避光条件下放置60min待测

2.0ml标准溶液 + 5ml邻苯二胺 → 于10ml试管中 → 摇匀、避光条件下放置60min待测

7.标准曲线的绘制：

60min后，将标准系列待测液立刻移入荧光光度计的石英杯中，于激发波长350nm，发射波长430nm条件下测定其荧光值，以标准系列荧光值减去标准空白荧光值为纵坐标，对应的维生素C质量浓度为横坐标，在EXCEL上绘制标准曲线

8.试样待测液的测定：

60min后，将标准系列待测液立刻移入荧光光度计的石英杯中，于激发波长350nm，发射波长430nm条件下测定
其荧光值，试样溶液的荧光值减去试样空白溶液荧光值，然后在标准曲线上查得对应维生素C质量。

注意事项：维生素C见光易氧化分解，所以整个实验应在避光下进行。

附件：

35婴幼儿食品和乳品中维生素C的测定.pdf

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