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液相色谱之基线下不来————有答案了!哈哈

液相色谱(LC)

  • 各位,今天做了几个实验,非常奇怪,基线上去就下不来,大家看看原因呗:

    制备条件如下:
    流动相 甲醇-10mmol碳酸氢铵水溶液
    波长:绿色的214;红色的254nm

    谱图见附件

    原因找到了,是制备色谱柱的问题:主要有两个原因,
    其一是流动相选择,样品是碱性的,且碱性较强,分析上面上样量太小看不出来,制备上面却拖尾严重;
    第二是孔径太小,导致在色谱柱上滞留严重,有些下不来。

    哈哈,总之感谢各位了~~

附件:

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  • 有水有渝

    第1楼2012/01/12

    应助达人

    是不是进样量太大了,只遇上过一次,检测有机合成反应液的时候,可能色谱柱中有大量残留,加大有机相清洗一下,再调回原来的流动相看看基线能不能恢复。

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  • sally0326

    第2楼2012/01/13

    制备的确实是有机合成的东东。
    换个流动相能调回来,可是就是不明白这个不换流动相为啥回不来?进样量太大不是应该不保留么,或者是说下来的时候也会有一定下滑弧度啊?可是这个到某一高度就不下降了,很是郁闷。已经是100%的甲醇清洗了,没法再加大流动相了。

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  • sssshine

    第3楼2012/01/13

    图里显示你在254nm时基线是稳定的,而在214nm下基线是上漂的,我认为和流动相有一定关系,你流动相里有甲醇,在低波长下不推荐使用甲醇做流动相,会有基线漂移的现象,检测波长选择最好大于流动相溶剂的截止波长20nm。

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  • sally0326

    第4楼2012/01/13

    但是有试过甲醇-水体系,在这个体系中甲醇是可以下来的,没有影响呢。
    确认过甲醇用的色谱纯,没有问题。而且假设是100%甲醇影响的话,应该吸收要一致啊,可是两个谱图,一个是到0.1AU处、两一个是到0.8AU处呢?

    纠结,相当纠结~~~

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  • 老多_小多

    第5楼2012/01/13

    是不是流动相不合适,所以洗脱强度不行造成的

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  • sally0326

    第6楼2012/01/13

    这个问题怀疑中~~~~

    可是还是觉得洗脱强度不够也不至于到某一吸收值之后就平了啊

    各位大虾给想想,还有啥可能?

    老多_小多(emoc98311) 发表:是不是流动相不合适,所以洗脱强度不行造成的

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  • tangtang

    第7楼2012/01/13

    测一下pH值是多少,会不会超出柱子的耐受范围?

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  • suiniubei

    第8楼2012/01/15

    好奇怪的一个缓冲液,你是从哪里弄来的?

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  • 有水有渝

    第9楼2012/01/19

    应助达人

    除非是有东西污染了检测池。

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