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流动相添加的物质有什么作用?

液质联用(LCMS)

  • 我接触液相质谱也有有一年多了,关于液相质谱流动相加什么,很是不清楚。只知道加酸为了峰形好看,至于加乙酸铵,甲酸,甲酸铵,磷酸盐等等的作用,很是不清楚,也只是看老师这么做也就这么多了,至于有什么好处有什么作用木有一知半解,包括流动相对色谱分离的影响、对质谱离子化的影响及其他相关作用,望各位老师大神能予以点化,不胜感激。

    难道全凭经验和尝试吗?
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  • gswsj

    第1楼2012/06/26

    磷酸盐肯定是不能用的。通常化合物在酸性条件下分离能够延长色谱柱寿命,对质谱检测器而言,在正离子情况下加酸是有利于离子化的。

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  • lyhapchy

    第2楼2012/06/26

    我说加磷酸盐是单独做液相的时候,以前做液相经常用这个,磷酸盐除了缓冲PH外还有其他作用吗?

    gswsj(gswsj) 发表:磷酸盐肯定是不能用的。通常化合物在酸性条件下分离能够延长色谱柱寿命,对质谱检测器而言,在正离子情况下加酸是有利于离子化的。

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  • chy57589893

    第3楼2012/06/26

    其实,无论加酸和加乙酸铵都是为了调整峰形,以前我们知道的加乙酸是为了去除拖尾,铵盐是去除前沿等,但是质谱流动相中不能加磷酸盐,仪器对不挥发性的盐类的耐受性很差,一定要注意

    lyhapchy(lyhapchy) 发表:我接触液相质谱也有有一年多了,关于液相质谱流动相加什么,很是不清楚。只知道加酸为了峰形好看,至于加乙酸铵,甲酸,甲酸铵,磷酸盐等等的作用,很是不清楚,也只是看老师这么做也就这么多了,至于有什么好处有什么作用木有一知半解,包括流动相对色谱分离的影响、对质谱离子化的影响及其他相关作用,望各位老师大神能予以点化,不胜感激。

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  • happy爱米粒

    第4楼2012/06/26

    缓冲PH,自然也就优化了峰形,提高了柱校,改善了分离度,保护了柱子,呵呵

    lyhapchy(lyhapchy) 发表:我说加磷酸盐是单独做液相的时候,以前做液相经常用这个,磷酸盐除了缓冲PH外还有其他作用吗?

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  • happy爱米粒

    第5楼2012/06/26

    加乙酸是为了去除拖尾,铵盐是去除前沿等?好像木听说过这个说法,可否详细解说一下

    chy57589893(chy57589893) 发表:其实,无论加酸和加乙酸铵都是为了调整峰形,以前我们知道的加乙酸是为了去除拖尾,铵盐是去除前沿等,但是质谱流动相中不能加磷酸盐,仪器对不挥发性的盐类的耐受性很差,一定要注意

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  • lyhapchy

    第6楼2012/06/27

    恩,谢谢啊,用质谱时老师再三强调了有的东西不能加!只是现在选择流动相加什么物质时,不知道按什么原则来选择,比如做一个物质液相分离时(单独液相),我是要选择酸、碱还是一些磷酸盐呢,这个有没有原则或者经验规则呢?

    chy57589893(chy57589893) 发表:其实,无论加酸和加乙酸铵都是为了调整峰形,以前我们知道的加乙酸是为了去除拖尾,铵盐是去除前沿等,但是质谱流动相中不能加磷酸盐,仪器对不挥发性的盐类的耐受性很差,一定要注意

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  • lyhapchy

    第7楼2012/06/27

    这个倒是,请问做流动相的时候加什么一般都是凭经验和尝试吗?有没有什么指导原则?

    木有才(xgy2005) 发表:缓冲PH,自然也就优化了峰形,提高了柱校,改善了分离度,保护了柱子,呵呵

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  • chy57589893

    第8楼2012/06/27

    乙酸的去拖尾作用大家应该都知道,铵盐的去前沿用处,也只是听其他老师说的,也有文献中见到过,具体原理的话,我也不甚清楚

    木有才(xgy2005) 发表:加乙酸是为了去除拖尾,铵盐是去除前沿等?好像木听说过这个说法,可否详细解说一下

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  • happy爱米粒

    第9楼2012/06/27

    如果单纯是液相色谱分离,
    碱性化合物,应该是尽量保持在碱性环境,比PKA大两个单位;酸性化合物,应该比PKA小两个单位,才能以分子形态存在
    如果是液质联用,色谱跟质谱就有点冲突了,有时候为了离子化效率提升,只好牺牲色谱了,质谱是不提倡使用不挥发性缓冲盐的,会造成管路和探头堵塞,离子源污染等

    lyhapchy(lyhapchy) 发表:恩,谢谢啊,用质谱时老师再三强调了有的东西不能加!只是现在选择流动相加什么物质时,不知道按什么原则来选择,比如做一个物质液相分离时(单独液相),我是要选择酸、碱还是一些磷酸盐呢,这个有没有原则或者经验规则呢?

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  • happy爱米粒

    第10楼2012/06/27

    其他一些添加剂信息


    TFA(三氟乙酸)
    -用于分析蛋白和多肽
    –它能抑制ESI+电离至少0.1%。
    –它将很大程度上抑制ESI-电离。
    TEA(三乙胺)
    –有丰富的m/z 102离子存在(三乙胺加质子的峰)。
    –抑制弱碱性化合物的ESI+电离,但能提高弱碱性化合物的ESI-电离。
    THF(四氢呋喃)
    –100% 的四氢呋喃可能会着火。
    –当喷雾气是空气时,在APCI电离方式,不能用四氢呋喃。
    –腐蚀PEEK管

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