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反向C18色谱柱可以进酸性流动相吗?

  • 向日葵的忧伤
    2014/03/24
  • 私聊

液相色谱(LC)

  • 悬赏金额:10积分状态:已解决
  • 要分析的样品是弱有机酸类物质,流动相需要酸性,请问磷酸、乙酸、甲酸等,哪个适合做C18色谱柱的流动相,浓度或者pH值多少合适?

zhoujin83 2014/03/25

现在一般的C18色谱柱,能耐受的pH范围是2-8,也有范围更宽的,可以参照色谱柱说明书。所以流动相中添加磷酸、甲酸、乙酸什么的都没有任何问题,只要pH在耐受范围即可。但是,选择流动相添加剂也是有讲究的,比如你方法选用的波长是210nm,那么最好不要用甲酸乙酸,因为甲酸乙酸的截止波长大于210nm,会造成基线漂移严重;另外,如果你流动相的pH是4.0,那么不建议使用磷酸盐,因为磷酸盐/磷酸在pH4.0附近是没有缓冲能力的,流动相的pH很容易发生变化,导致出峰重现性差。

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  • 千层峰

    第1楼2014/03/24

    以前用ODS C18,流动相中还添加了少量三氟乙酸。

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  • 小不董

    第2楼2014/03/24

    应助达人

    甲酸和乙酸都是有机酸,样品中没这两酸?
    现在的柱子一般都可以承受酸的,一般耐碱性弱点。
    要考虑加了酸后,有机酸的吸收可能比较低,pH值多少才能使其分离好需要摸索。

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  • 向日葵的忧伤

    第3楼2014/03/24

    样品是二萜类酸,应该用什么做流动相呢?但是柱子一般能承受多大浓度的酸呢?

    小不董(doxw0323) 发表:甲酸和乙酸都是有机酸,样品中没这两酸?
    现在的柱子一般都可以承受酸的,一般耐碱性弱点。

    要考虑加了酸后,有机酸的吸收可能比较低,pH值多少才能使其分离好需要摸索。

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  • donglixian

    第4楼2014/03/24

    酸性大写没事,我正常用5%硫酸冲柱

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  • lifesinger

    第5楼2014/03/24

    今天C18用的流动相,其中的缓冲溶液PH是2.4的。

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  • 向日葵的忧伤

    第6楼2014/03/25

    但是最近单标总是出双峰,也用甲醇水洗过柱子,还是这样,是不是柱子出了问题?

    donglixian(donglixian) 发表:酸性大写没事,我正常用5%硫酸冲柱

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  • e_liang369

    第7楼2014/03/25

    5%的硫酸也敢用来冲柱?

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  • yjq19851229

    第8楼2014/03/25

    磷酸比较适合,缓冲溶液就好

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  • zhoujin83

    第9楼2014/03/25

    现在一般的C18色谱柱,能耐受的pH范围是2-8,也有范围更宽的,可以参照色谱柱说明书。所以流动相中添加磷酸、甲酸、乙酸什么的都没有任何问题,只要pH在耐受范围即可。但是,选择流动相添加剂也是有讲究的,比如你方法选用的波长是210nm,那么最好不要用甲酸乙酸,因为甲酸乙酸的截止波长大于210nm,会造成基线漂移严重;另外,如果你流动相的pH是4.0,那么不建议使用磷酸盐,因为磷酸盐/磷酸在pH4.0附近是没有缓冲能力的,流动相的pH很容易发生变化,导致出峰重现性差。

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  • 支点

    第10楼2014/03/25

    应助达人

    质谱方法上用甲酸挺多,也是C18,也可以用甲酸-甲酸铵缓冲体系

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