食品添加剂重要检测之防腐剂

食品添加剂重要检测之防腐剂

1.材料与方法

1.1 仪器与试剂

仪器：

高效液相色谱仪（紫外检测器+高压输液泵+柱温箱+C18色谱柱+手动进样阀+在线脱气机等），超声波清洗仪，溶剂过滤器，电子天平等。

试剂:

1. 甲醇（CH3OH）：色谱纯；

2. 乙酸铵（NH4Ac）：A.R.；

3. 安赛蜜标准储备液（1.0mg/mL）国家标准物质中心；

4. 苯甲酸标准储备液（1.0mg/mL）国家标准物质中心；

5. 山梨酸标准储备液（1.0mg/mL）国家标准物质中心；

6. 糖精钠标准储备液（1.0mg/mL）国家标准物质中心；

7. 纯水。

1.2 色谱条件

检测器：紫外-可见光检测器

色谱柱：C18，250mm×4.6mm，5μm；

流动相：0.02mol/L 乙酸铵：甲醇=95：5（V：V）；

波长：230nm；

流速：1.0mL/min；

进样量：20μL；

柱温：室温。

安赛蜜、苯甲酸、山梨酸和糖精钠标准混合液（0.04、0.04、0.02、0.04μg/μL）。色谱图:2. 结果与讨论

2.1 标准曲线绘制

安赛蜜、苯甲酸、山梨酸、糖精钠标准混合液的配制。吸取苯甲酸、山梨酸、糖精钠标准储备液，配制浓度分别为0.02、0.04、0.06、0.08、0.10μg/μL 的标准混和液。按上述色谱条件测定峰面积，并绘制校正曲线。见图：

由图可见，安赛蜜、苯甲酸、山梨酸、糖精钠校正曲线的线性关系良好（相关系数均大于0.99900）。

2.2 安赛蜜、苯甲酸、山梨酸和糖精钠测定精密度试验

在上述色谱条件下，连续六次吸取苯甲酸、山梨酸和糖精钠标准混和液（浓度分别为2.0、2.0、1.0、5.0μg/μL）20μL 注入色谱仪，色谱图如下：2.2.1 保留时间测定精密度试验, 见表1。

2.2.2 峰面积测定精密度试验，见表2。

由表1～2 可见，苯甲酸、山梨酸和糖精钠保留时间相对标准偏差（RSD）范围为0.20～0.50%；峰面积相对标准偏差（RSD）范围为0.50～0.90%。表明仪器系统测定精密度良好。

2.3 内控样品测定

用某可乐饮料作基质，配制含安赛蜜、苯甲酸、山梨酸和糖精钠浓度分别为0.04、0.04、0.02、0.04μg/μL 的内控样品（加标）。与样品采用的预处理方法相同。在同样条件下测定安赛蜜、苯甲酸、山梨酸和糖精钠含量。结果分别为0.0414、0.2547、0.0694、0.0395μg/μL。不加标样品含量为0、0.2156、0.0470、0μg/μL，回收率均在97%以上，见图（加标、不加标样品测定）：

3. 结论

该方法采用高效液相色谱仪测定食品中安赛蜜、苯甲酸、山梨酸和糖精钠，具有灵敏度高、选择性好、分离度好、回收率高、精密度和线性关系良好、结果准确等特点。该方法适用于饮料及食品中安赛蜜、苯甲酸、山梨酸和糖精钠含量的测定。

4.样品前处理说明

一般的防腐剂都易溶于水或甲醇类有机相，测防腐剂的样品绝大多数都是经过溶解、提取、过滤处理等过程，有时也会涉及到定容、稀释或浓缩等处理。溶解一般采用水或甲醇等试剂，有时为了加快溶解速度和溶解效果也结合如振动、加热等方式；提取在这相对重要，一般采样超声振动提取、离心提取、固相萃取等方式；过滤一般分两种，一种是采用滤纸等粗过滤，主要是滤掉那些大的颗粒物，另一种是微膜过滤，主要是滤去那些溶解（或悬浮）于溶液中的物质。当然有时也会用到一些较复杂、较难的样品前处理方法，如药物及保健品中含有较多结构或性质和防腐剂接近的物质，这些方法一是用的较少，在就是我们这方面做得也较少，经验不多，在此就不卖关子了。但大家如果有这方面较复杂样品前处理的方法的可以拿来一起探讨、分享。小弟在此多行感谢了！