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【求助】新手做制备液相,不知道进样量是多少

液相色谱(LC)

  • 实验室最近卖了一台制备液相,周围都没有人用过,我也不知道去哪里请教人,这里有人用过制备液相吗?我想把我从硅胶柱子下来的东西上制备柱子,条件已经基本用分析的液相摸好了,但是不知道制备液相的上样量是多少,如何上样,有什么注意事项?
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  • tianru的爸爸

    第2楼2006/10/04

    如果是凝胶柱,上柱床体积的20%之内;如果是其它类型的柱子,上到过载之前为止(要多试试才知道)。
    如果柱有说明书,那就按照说明书上的要求来。

    wohaojian 发表:实验室最近卖了一台制备液相,周围都没有人用过,我也不知道去哪里请教人,这里有人用过制备液相吗?我想把我从硅胶柱子下来的东西上制备柱子,条件已经基本用分析的液相摸好了,但是不知道制备液相的上样量是多少,如何上样,有什么注意事项?

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  • tjsxy

    第3楼2006/10/04

    同意2楼的说法,原则上浓度尽量大,但不应过载,注意收集时的精度,当然这都要靠你自己摸索!

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  • zhengfei898

    第4楼2006/10/05

    原则上浓度尽量大,但不应过载,注意收集时的精度,当然这都要靠你自己摸索!祝你好运!

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  • no2good

    第5楼2006/10/06

    请问过载量怎么算呢,我们没有柱子的说明书,让我做都几次,不太可能,样品就那么一点,而且样品进样前是不是也要用甲醇溶了,然后再用微孔滤膜过滤呢?注射器又是长什么样的,和进分析型液相的一样吗?

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  • canpingp2222

    第6楼2006/10/06

    注意柱子的内径大小和填料重量 大概可以估计上载量 同时注意柱的分离效率

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  • no2good

    第7楼2006/10/06

    昨天看了化工出版社的制备色谱应用,不知道有用否?它说色谱柱的饱和容量等于0.4X柱分离材料的总表面积

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  • tianru的爸爸

    第8楼2006/10/06

    大量样品进柱后,因为量过了柱子的承载量,所以过载了,也就是说样品有流出,在穿透里面有要的东西。把穿透检测一下就可以了。


    最好用最初的流动相溶解来上样。如果能过滤,最好过滤,能保护柱子。

    [div]原文由 wohaojian 发表:请问过载量怎么算呢,我们没有柱子的说明书,让我做都几次,不太可能,样品就那么一点,而且样品进样前是不是也要用甲醇溶了,然后再用微孔滤膜过滤呢?注射器又是长什么样的,和进分析型液相的一样吗?[/div]
    注射器是手工上样时用的,如果做制备,应该不用这个,因为上样体积会不大。

    wohaojian 发表:请问过载量怎么算呢?
    原文由 wohaojian 发表:请问过载量怎么算呢,我们没有柱子的说明书,让我做都几次,不太可能,样品就那么一点,而且样品进样前是不是也要用甲醇溶了,然后再用微孔滤膜过滤呢?

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  • no2good

    第9楼2006/10/06

    穿透里面,是什么阿?你有qq吗?你能加我吗?我的是76188699

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  • tianru的爸爸

    第10楼2006/10/06

    简单点说:正常情况下,穿透里面只有你不要的东西。
    在做制备时,多数情况下,需要把你需要的物质先溶解在你的最初的流动相中,如你所说的甲醇溶液中,然后上柱制备;上柱时,要将你的目标物质先通过某种方式留在柱中,而与干扰物质分开。在上柱时,从柱子中流出的溶液或流动相就称为穿透。

    wohaojian 发表:穿透里面,是什么阿?

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