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UV检测器,样品峰出峰后基线不归零走负基线,该从哪方面开始排查问题

液相色谱(LC)

  • 各位师兄好。
    小弟近日在做对乙酰氨基酚方法学验证。
    之前做的图谱 虽说重现性不佳,但终究可以通过excel凑出账面上磨平的记录
    这两天遇到一问题,不管是样品峰还是内标峰,出峰后,基线不归零,走负基线
    此为正常色谱图。

    此为走负基线色谱图

    此两张图谱为平行样。
    并非每次都是第一个样品峰出现此情况,也有第二个内标峰单独出现负基线的情况,更有甚者,两个峰都负基线的情况都发生过。
    但是也不是每次都会有负基线,属于无规律出现。
    怀疑过检测器灯不给力,打400问过售后,工程师说灯能量正常。
    怀疑过色谱柱,换了一根,刚换那天没事,隔天来做又这个德行。

    说下色谱条件,waters2695 2487检测器,C18,流动相 甲醇 水 冰醋酸 29+68+3,波长275nm,样品已用流动相定容。
    请版里师兄指点该如何一步步排查,谢谢。
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  • kanhama

    第1楼2015/05/28

    我现在有点怀疑是不是检测器置零(志玲姐姐?调节下气氛)这方面有问题,不知道哪里可以重置或者手动调零。
    检测器条件我确认过,没有变更波长。

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  • 浪淘沙隐

    第2楼2015/05/28

    个人怀疑是方法问题,不过没有根据。

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  • kanhama

    第3楼2015/05/28

    之前多次做过此实验,均无此现象。近两天忽然如此。

    原文由zhoujin83发表: 个人怀疑是方法问题,不过没有根据。

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  • 飘殇

    第4楼2015/05/29

    单走流动相有什么现象吗?

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  • 一片枫叶

    第5楼2015/05/29

    应助达人

    可能是氘灯的瞬间熄灭——已接近寿命,氘灯线路老化接触不良,光路系统老化瞬间干扰。

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  • wslmpol

    第6楼2015/05/29

    不进样运行方法走几针试试看?OK的话进几针空白试试。

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  • kanhama

    第7楼2015/05/29

    打过几针空白,很是靠谱。我现在发现这情况是随机事件,时好时坏,说不定这针就很ok,说不定下一针就负基线。按照这个思维,很难确定我那两针空白是真靠谱,还是只是碰上了靠谱的时间。

    原文由wslmpol发表: 不进样运行方法走几针试试看?OK的话进几针空白试试。

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  • kanhama

    第8楼2015/05/29

    大概去年年底新换的灯,400工程师说灯能量很好,使用时间约1000小时

    原文由v2960432发表: 可能是氘灯的瞬间熄灭——已接近寿命,氘灯线路老化接触不良,光路系统老化瞬间干扰。

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  • 浪淘沙隐

    第9楼2015/05/29

    也可能是光路问题,可能光栅位置有点变化,或者光路其他有点问题。其实可以问问厂家是什么情况。

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  • kanhama

    第10楼2015/06/04

    各位师兄,小弟带来最新进展了!
    经过分段排查以及以往图谱,最近新增情况,终于判断问题的所在。
    实验室这台2695-2484,其实并非单单是2695-2487,
    当初实验室还有515泵配手动进样器,紫外检测器这一套老家底,后来老家底的检测器坏了,就把进样器的信号线接到了如今2695的检测器上,如今是2695-2487一个系统, 515泵、手动进样器、2487一个系统。两个系统公用一个检测器。
    前段时间用过515这个系统,使用结束后手动进样器处于inject方向,也许是年久不稳定,时不时的手动进样器给检测器一个进样信号,可以解释为什么有个小台阶调零。目测就是这么一个不起眼的动作导致这次的事件。
    如今不用515系统之时就不把进样信号线插进检测器,问题解决。
    延伸思考一下,个人觉得手动进样实验结束把进样器摆至load即无此问题,这事把我弄得……身心俱疲。但至少如今遇到此类情况能多一个考虑问题的方向,有提升,值得了!如果以后有哪位同仁遇到类似情况不妨考虑一二信号线。
    祝各位仪器常年健康,实验顺利!

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