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同一仪器同一柱子,单针进样和批处理,除出峰时间外都有明显不同,说说你的看法以及验证方法,有效解决方案,高手请进

液相色谱(LC)

  • 同一仪器同一柱子,单针进样和批处理,除出峰时间外都有明显不同,说说你的看法以及验证方法,有效解决方案
  • 该帖子已被版主-夏天的雪加2积分,加2经验;加分理由:话题
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  • m3089650

    第1楼2016/03/17

    现在保留时间也变了,理论塔板数第一次和第二次相差2000

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  • nixiaolong

    第2楼2016/03/17

    lz 把分析条件讲清楚点,检测什么样品 什么参数,以便于分析问题。我的第一感觉是不是柱子原因

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  • m3089650

    第3楼2016/03/18

    就是款冬花的含量测定,按照药典上面操作的,柱温设的是40度,流速是1ml/min
    药典以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以甲醇-水(85:15)为流动相;检测波长为220nm。理论板数按款冬酮峰计算应不低于5000。
    样品理论塔板数刚刚开始还有3900,后来慢慢减到2400左右,而样品从刚刚开始的2000多降到了1000多;
    我查过之前这根柱子在另外一台机子上面的记录,对照品有9000多样品有5000多,峰型要漂亮很多,现在这台机子峰有点拖尾,分离度也不是很好;
    因为刚刚进这家公司实验室还不是很熟悉,流动相什么的都是同事给配的,我现在在排除具体原因,从样品到流动相自己重新做一遍

    nixiaolong(nixiaolong) 发表:lz 把分析条件讲清楚点,检测什么样品 什么参数,以便于分析问题。我的第一感觉是不是柱子原因

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  • abzh99312

    第4楼2016/03/18

    上张前后比对图,另确认一下柱压的变化情况。
    另外不太明白你说的“单针进样和批处理”的批处理什么意思?是指连续进样?如果连续进样,而图谱略有不同可能是前针峰未出完导致吧,毕竟保留时间对的上。
    如果有新柱,更换试试塔板怎么样,感觉就是柱子需要维护或者该换了。

    m3089650(m3089650) 发表: 就是款冬花的含量测定,按照药典上面操作的,柱温设的是40度,流速是1ml/min
    药典以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以甲醇-水(85:15)为流动相;检测波长为220nm。理论板数按款冬酮峰计算应不低于5000。
    样品理论塔板数刚刚开始还有3900,后来慢慢减到2400左右,而样品从刚刚开始的2000多降到了1000多;
    我查过之前这根柱子在另外一台机子上面的记录,对照品有9000多样品有5000多,峰型要漂亮很多,现在这台机子峰有点拖尾,分离度也不是很好;
    因为刚刚进这家公司实验室还不是很熟悉,流动相什么的都是同事给配的,我现在在排除具体原因,从样品到流动相自己重新做一遍

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  • 有水有渝

    第5楼2016/03/18

    应助达人

    如果是一个渐变过程,可能是色谱柱被污染了,样品不干净。

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  • nixiaolong

    第6楼2016/03/18

    柱效下降可能性比较大,换一根新柱子看看

    m3089650(m3089650) 发表: 就是款冬花的含量测定,按照药典上面操作的,柱温设的是40度,流速是1ml/min
    药典以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以甲醇-水(85:15)为流动相;检测波长为220nm。理论板数按款冬酮峰计算应不低于5000。
    样品理论塔板数刚刚开始还有3900,后来慢慢减到2400左右,而样品从刚刚开始的2000多降到了1000多;
    我查过之前这根柱子在另外一台机子上面的记录,对照品有9000多样品有5000多,峰型要漂亮很多,现在这台机子峰有点拖尾,分离度也不是很好;
    因为刚刚进这家公司实验室还不是很熟悉,流动相什么的都是同事给配的,我现在在排除具体原因,从样品到流动相自己重新做一遍

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  • m3089650

    第7楼2016/03/21

    这边还在试生产,什么都木有啊,柱子申请很难

    nixiaolong(nixiaolong) 发表: 柱效下降可能性比较大,换一根新柱子看看

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  • m3089650

    第8楼2016/03/21

    我这边怎么上传不了图片

    abzh99312(abzh99312) 发表: 上张前后比对图,另确认一下柱压的变化情况。
    另外不太明白你说的“单针进样和批处理”的批处理什么意思?是指连续进样?如果连续进样,而图谱略有不同可能是前针峰未出完导致吧,毕竟保留时间对的上。
    如果有新柱,更换试试塔板怎么样,感觉就是柱子需要维护或者该换了。

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  • seannoy

    第9楼2016/03/21

    实在没看懂楼主的意思 塔板数降低是保留时间提前了?

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  • 夏天的雪

    第10楼2016/03/21

    应助达人

    将这根色谱柱换到原来的设备上进行测试,检测塔板数,如果塔板数还是很高,则仪器有问题,如果塔板数也降低了,则色谱柱出问题的可能性较大

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