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[求助]Tween80的HPLC测定方法，急！

chainxk

2006/12/03

液相色谱（LC）

本人想用1100测定水溶液中Tween80的浓度，查到的一篇文献上是采用waters的仪器测的：Symmetry C18 column (Waters.); UV detector (Waters. 490E).
HPLC的操作条件如下:流速1.0 mL/min, 流动相为乙腈和水（85/15, v/v) 波长为236 nm。我采用的是1100的仪器，XDB C18柱，操作条件一样，但是没有出峰。请问大家，是否柱子不对？如何才能出峰？谢谢！

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flyfox

第1楼2006/12/04

你的样品浓度是多少？
有没有二极管阵列检测器，如果有的话，进个样品看看它的光谱图，确定下最大吸收波长是否正确。
一般不出峰，可能是样品没有检测到，如浓度太低或者选择波长不对，另外还可能样品在色谱柱上保留太强，没有洗脱下来。你可以试试把有机相比例调高点试试。
当然，还有可能就是你说的色谱柱选择不对，不同的色谱柱选择性不同，有些样品的确存在挑色谱柱的情况。

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什么都不懂

第2楼2006/12/04

看看管路连接是否正确，我以前就因为管路没连接好费了半天劲。
chainxk 发表:本人想用1100测定水溶液中Tween80的浓度，查到的一篇文献上是采用waters的仪器测的：Symmetry C18 column (Waters.); UV detector (Waters. 490E).
HPLC的操作条件如下:流速1.0 mL/min, 流动相为乙腈和水（85/15, v/v) 波长为236 nm。我采用的是1100的仪器，XDB C18柱，操作条件一样，但是没有出峰。请问大家，是否柱子不对？如何才能出峰？谢谢！

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