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反相高效液相测定有机酸

  • 都来碾压我
    2017/08/06
  • 私聊

液相色谱(LC)

  • 最近在用液相测定有机酸(草酸,酒石酸,苹果酸,柠檬酸,琥珀酸,乙酸,丙二酸),在测定过程中发现会出现明显的溶剂峰(进空白超纯水也会出现),而且与草酸出峰时间接近,直接导致混标中溶剂峰和草酸的峰出现肩峰,这是溶剂效应导致的么?如果用流动相溶解会消除这种影响吗?色谱柱为 ZORBAX SB-Aq (5 μm,4.6×150 mm)。流动相为:20 mmol/L的 KH2PO4溶液(用H3PO4调节pH=2.5):甲醇=95:5(V/V),紫外检测器,检测波长为210 nm,流速为1mL/min,进样量为20 μL,柱温30 ℃。希望大牛帮忙解决下啊。附图如下(是五中酸的结果,1是草酸和溶剂峰)
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  • 有水有渝

    第1楼2017/08/07

    应助达人

    有机相已经很少了,流动相调整空间不大,除非换亲水柱,直接换250mm的长柱试试。
    楼主是手动进样还是自动进样,查一下空白的来源,那个空白峰已经基本是死时间了。

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  • 都来碾压我

    第2楼2017/08/07

    这个柱子可以耐受100%水相的,我也试过效果也不理想,250mm的柱子也尝试过,但溶剂峰依然存在,只不过出峰时间有所延长,空白用的是超纯水,会是溶剂效应么?因为不是用流动相溶解的标样。

    有水有渝(xky0230699) 发表:有机相已经很少了,流动相调整空间不大,除非换亲水柱,直接换250mm的长柱试试。
    楼主是手动进样还是自动进样,查一下空白的来源,那个空白峰已经基本是死时间了。

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  • 支点

    第3楼2017/08/07

    应助达人

    溶剂峰的位置可能是溶剂,也可能是其他不保留杂质,用流动相复溶样品可能会改善但不一定。

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  • 有水有渝

    第4楼2017/08/07

    应助达人

    只能用流动相稀释上机溶液看看能不能消除那个干扰峰,另外用纯水相做的结果能不能上个图看看。不行就换其它色谱柱试试。

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  • 都来碾压我

    第5楼2017/08/07

    关键是每个酸的标样都会出现这个峰,如果是杂质的话,那每个标样都有么?还是您觉得杂质来源于其他地方呢

    支点(zhx_fs_ln) 发表:溶剂峰的位置可能是溶剂,也可能是其他不保留杂质,用流动相复溶样品可能会改善但不一定。

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  • 都来碾压我

    第6楼2017/08/07

    我现在的想法是进一针流动相看看,会不会还有这个峰的出现,如果没有的话以后就用流动相来溶解标样了。关于柱子的问题,这个柱子应该是安捷伦专门测有机酸的柱子,讲道理应该没问题的,我也换过别的柱子试过,还是会有溶剂峰。这个是空白的图,是后来用250mm的柱子做的。

    有水有渝(xky0230699) 发表:只能用流动相稀释上机溶液看看能不能消除那个干扰峰,另外用纯水相做的结果能不能上个图看看。不行就换其它色谱柱试试。

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  • 支点

    第7楼2017/08/08

    应助达人


    安捷伦耗材手册上的截图,是否合适。

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  • 有水有渝

    第8楼2017/08/08

    应助达人

    为什么溶剂峰会那么大?按理溶剂是有点负峰。

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  • 都来碾压我

    第9楼2017/08/08

    我也不明白啊,用了两个实验室的up水都是这样。

    有水有渝(xky0230699) 发表:为什么溶剂峰会那么大?按理溶剂是有点负峰。

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  • 有水有渝

    第10楼2017/08/08

    应助达人

    手动进样还是自动进样,能不能进空针看看是什么状况

    都来碾压我(v3169260) 发表: 我也不明白啊,用了两个实验室的up水都是这样。

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