面积归一化法测含量的方法学验证

正在准备做归一化方法验证，看到这个帖子回复下。

1、现在我需要进行方法学验证，那么线性的几个不同浓度点我该怎么去设置呢？是通过不同称样量来衍生化得到还是衍生化一个后稀释得到？那么稀释液又该选用那个呢？溶液1还是溶液2还是其他什么溶液呢？线性图中的横轴和纵轴分别用什么来表示呢？

我认为线性只是考虑检测器对不同浓度的响应，直接稀释衍生后的溶液即可，无需制备梯度溶液后再去衍生；不同浓度衍生的影响已在准确度中验证，线性无需考虑。

稀释液是你最终进样的溶液。

横坐标就是原称量计算的对照的浓度，纵坐标响应值。

还有系统适应性溶液需要先进上面要求的系统适用性溶液后再进5针对照溶液呢？还是直接将上述的系统适用性溶液重复进5针？怎么算其RSD%，用供试品回流还是对照品回流？因为我想假如用对照品进行衍生化，那么其含量是100%，那还怎么考察呢？

归一化法系统适用性一般无需考虑对照重复性，直接进样SST一针，看分离度即可，可考虑序列后回针SST，判断实验过程系统的稳定度。

后半句没理解您的意思。如果考察实验的回收率（准确度），需要做对照品回流，100%浓度对照品回流后计算的浓度/理论浓度，这个值在设定的范围内实验有效，如果超出接受的范围，应考虑优化实验或者使用校正因子。

未能了解您方法全貌，可能有不适当之处，请指出，谢谢！