我是风儿
第1楼2019/06/09
准确称取4 g试样(精确至0.01g)于50 mL离心管内,加入5 mL饱和氯化钠水溶液,混匀,准确加入10mL乙腈,用均质机以10000 r/min 的速度均质30 s,振摇, 3500 r/min离心5 min,移取5ml上清液至另一50 mL离心管中,加入5mL乙腈饱和正己烷,涡旋混匀1min,3500 r/min离心5 min,准确移取下层乙腈2.5mL于10mL比色管中,加水定容至5 mL,混匀,15000 r/min离心5 min,过0.22 μm滤膜至进样瓶中,上机测试。
【说明】
提取溶剂直接经净化稀释上机,应使用色谱纯乙腈; 涉及定量,应准确移取;
由于双甲脒代谢物(2,4-二甲基苯胺)的极性较强,在上机溶液和起始流动相比例均在50%乙腈条件下目标物在反相C18柱上保留较弱,干扰较大,故检测时选择对极性化合物保留更强的HSS T3 1.8μm柱。
实验发现,目前实验室常用的津腾有机滤膜本身材质含有2,4-二甲基苯胺,故检测时应选用安谱或迪马品牌的有机滤膜进行过滤,防止污染。
我是风儿
第2楼2019/06/09
仪器:LC/MS
色谱柱:ACQUITY UPLC HSS T3 1.8μm
柱温:30 ℃;进样量:10 μL;
流动相:A: 5mmol/L醋酸铵水(含0.1%甲酸),B: 乙腈 流速: 0.2 mL/min;梯度洗脱
Iron Source: ESI ;Capillary: 4 kV;Fragmentor:135;Delta EMV: 300;Gas Temp: 350 ℃; Gas Flow: 11 L/hr;Nebulizer: 35 psi。
Time(min) 0.0 1.0 1.2 4.5 5.0 10
A% 50 50 10 10 50 50
huanwang
第4楼2019/06/09
按照21169-2007上的方法提取的:5g试样加5mL 0.1mol/L 氢氧化钠于50mL离心管中,涡旋混匀1min,再加15mL混合提取液(正己烷-异丙醇6:3)涡旋1min,4000转离心5min,吸取上层液于50mL圆底烧瓶中;下层液体再加10mL正己烷涡旋1min,离心,吸取合并上层液,40度水浴旋蒸浓缩至干,用0.5mL乙腈溶解残渣,转移至1.5mL离心管中,再加入0.5mL水溶解残渣,合并转移至1.5mL离心管中,混匀(这里方法上有个10000转离心5min,我没做,难道这步出问题了???我前面做蜂蜜样品的时候做了这一步,离心后没什么效果,所以后来做加标回收的时候就省掉了),过膜,待测。