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色谱柱活化

  • Insm_50e7fbf6
    2020/04/09
  • 私聊

液相色谱(LC)

  • 请问各位大佬,新的色谱柱活化的目的是什么,一般怎么活化,谢谢。
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  • Insm_19b9a9c8

    第1楼2020/04/10

    应助达人

    液相色谱柱活化的方法因柱子而异,普通反相C18柱的话我是这样活化的:1ml/min流速的甲醇冲洗2小时以上。液相的新色谱柱都是保存在一定的保存液中的,所谓的活化就是替换掉其中的保存液,冲洗掉柱中可能残留的其他杂质,以免影响后续分析工作。

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  • xiaogumd11

    第2楼2020/04/10

    应助达人

    对于新的液相色谱柱或是刚安装上的液相色谱柱,把流动相流速调大点,如1-2ml/min,100%甲醇,打开排空阀,冲洗30分钟以上,就相当于色谱柱的活化。

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  • 我想当科学家

    第3楼2020/04/10

    一般C18柱建议0.5的流速100%甲醇至少冲3-4小时,一方面可以充分浸润填料以及柱床,冲走里面的一些杂质,另外也不至于因流速过快导致柱塌陷,长期不用的柱子或新柱子用小流速缓慢冲洗比较稳妥。

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  • Insm_d02f971c

    第4楼2020/04/10

    应助达人

    色谱柱在出厂时都会做柱效测试,并把色谱柱保存在柱效测试溶剂中运输,拿到新主子后,要用纯有机试剂(甲醇或乙腈)进行火化平衡20个柱体积,若你所用流动线不含缓冲盐,则直接用流动相过度即可,若你所用流动相含有缓冲盐,则需要再用与你流动相配比相同的有机溶剂和超纯水来过度5个柱体积,过度时若为等梯度,则直接过度即可,若为梯度,则用初始比例就可以

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  • 有水有渝

    第5楼2020/04/10

    应助达人

    一般情况C18柱用甲醇冲洗20分钟左右就可以了,其实也没有活化啥,只要里面没有干了,直接上流动相也不会有什么问题

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  • m3020341

    第6楼2020/04/11

    应助达人

    看一下需要用于什么项目,看下检测项目的有机的流动相和新柱子里面的保护液是否相同,如果相同可以先用有机相低流速冲洗,再按照测试方法的有机相和水相比例冲洗,再慢慢变大流速直至到方法所需流速;如果与保护液不相同,则需要先用异丙醇进行冲洗,再改成检测项目所用方法的有机相,之后再继续。在冲柱子时,流速都要从小到大,尤其是用异丙醇时,调节要更小一点,不然柱压变化会比较大。

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  • 歌名

    第7楼2020/04/14

    应助达人

    现在的厂商一般都会宣称自己的柱子可以直接用上机用的(大部分厂商确实这样做了的,具体做的好不好不好说),但是色谱柱一般保存期比较长,保存条件也不尽如意,所以每次用新的色谱柱都要做所谓的活化(其实就是置换一下封存液),明白这些东西也知道怎么做做到什么程度了。现在普遍做法基本都是用纯色谱纯有机试剂长时间低速冲洗(试剂早年间都是用甲醇多,现在在仪器安装的时候工程师一般会推荐你用乙腈什么的;流速在柱子的承压范围内都是可以的,看你的自己时间,有时间零点几的流速冲洗过夜都可以,没时间1.2-1.5冲1-2小时也行,当然也要看你的柱子脏不脏,主流品牌柱子基本不会存在什么问题),处理完后开机测试几针就OK了

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