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今天发现一件关于鬼峰的怪事,没找到原因。

  • 提莫酱爆小蘑菇
    2020/06/19
  • 私聊

液相色谱(LC)

  • 今天测了几批样品,总共是1,2,3,4,5,6共六批,每批样品配制两个样品,分别配制了1-1,1-2,2-1,2-2以此类推。

    走了几针后去看前几针结果,发现第一批的第一针是正常的,

    第二针开始,在样品峰前面都出了一个比较矮胖的峰,且接下来出来的2-1,2-2,3-1都有,面积大小不是非常固定,且占总峰的百分比也不是恒定的。

    很是奇怪,不知道问题出在哪里,理论上这个位置是不会有峰的,且这个峰也不像什么杂质峰。

    于是我把第一针(1-1)又重新走了一遍,即原样复测,发现这针那个峰也有了,但是峰很低很小,占比0.125%

    空白,第一批样1,第一批样2,第二批样1,第二批样2 对比图,10.8那个峰就是鬼峰,第一批样1(1-1)是没有那个峰的

    第一批样1(1-1)复测、第一批样1(1-1)、空白对比图,复测后出现了峰,但是峰不高

    这个峰的峰面积变化如下表


    流动相为0.1%TFA的水,0.1%TFA的乙腈,50%:50%等度洗脱,30min,C18色谱柱。

    -

    目前已经走到了第三批样2(3-2),鬼峰依然存在,我想起了昨天走乙腈空白对比的时候也有过类似问题

    此处用的方法,流动相都不一样,流动相是0.1%磷酸,乙腈,进行梯度洗脱,总时长35Min.C18色谱柱,色谱柱为同一根。

    -

    昨天做对比的情况如下:

    不进样走了(瓶号设置-1)走了几针,没有大的鬼峰出现,后来取了乙腈进样,为了避免滤头的杂质影响判断,于是直接用滴管吸取乙腈放入小瓶,

    分别进样5针,第一针也是没有大的鬼峰出现,但是后面四针都有鬼峰,还很大。

    无法理解为什么第一针没有后面都有了,于是我只能排查可能的原因,是否是滴管的问题,于是又取了一次乙腈,直接倒入小瓶,不经过滴管。

    进样后还是一样的结果,出现鬼峰,而且不同时间段排的时候也会出现连续排样的时候,第一针没有,第二针开始就有了。

    附空白乙腈对比的图,16min左右那个峰就是很大的鬼峰。


    昨天出现这个问题的时候我没放心上,因为之前走样品的时候,空白和样品都是没问题的。

    直到今天排成品样的时候才重视起来。

    不知道是否有人遇到过这种情况,可能有什么原因??

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  • 有水有渝

    第1楼2020/06/19

    应助达人

    是不是前一针的残留,把每针都采集40分钟试试。另外把以前做的没有问题的样品拿出来重测一下看看,如果还有问题,就把流动相用到的试剂排查一下,用新的试剂配制流动相试试。

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  • sdlzkw007

    第2楼2020/06/19

    应助达人

    最大的疑点还是进样的六通阀有残留,不论是自动还是手动都建议拆开转子密封垫片,对整个六通阀清洗后复原再试一下

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  • 爱吃水果的大胖子

    第3楼2020/06/19

    依经验来看,你这问题十有八九是采集时间不够,导致第一针样品没走完,留到了下一针去了,你最后加几个空白,应该会有未知峰出现在第一针空白上。

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