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什么是基线分离?
lijing320323
2021/09/17
私聊
液相色谱(LC)
基线分离是每一个色谱分离工作者在兼顾效率前提下的终极追求。理论上,当分离度等于1.5时,即可认为达到了基线分离。为什么是“即可认为”,而不是绝对认为呢?这里面涉及到正态分布/高斯分布,3σ,6σ等概念。这些概念稍显顽固,我们给予记过并留待察看,暂不深入追究。用点色谱参数里常用的名词,再加一点通俗语言来说就是,对称因子为1.0的两个高矮胖瘦一模一样的色谱峰,当分离度为1.5时可认为是基线分离。比如,下图1显示的某药典给出的有点标准的示例图。
图1 基线分离示例
但是,理论指导实践,实践是检验真理的唯一标准。比如说,上面对于基线分离的描述情形,在实际工作中基本不可能,而且说“基本”是为了满足“一切皆有可能”的严谨,否则可以直接说“根本不可能”。因为德国哲学家莱布尼茨说,世界上没有完全相同的两片树叶,而每一个色谱工作者都可以说,世上没有完全相同的两个色谱峰。
实际情况是,往往相邻色谱峰各有千秋,导致同一个分离度会出现完全不同的分离效果。比如下图2,两个不同比例的色谱峰,在不同分离度情况下的分离表现,在分离度0.6时尤为明显:当后峰是前峰的1/16时,还能看出是两个峰吗?
图片
图2 分离度及谱峰相对大小(面积)与分离度关系《实用高效
液相色谱
法的建立》
既然如此,那我们就不要再执念于分离度1.5了,也不要自欺欺人的出具一个显示分离度大于1.5的色谱报告而不看实际分离效果了。
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