高效液相色谱用50%甲醇冲洗C18新柱子。0.3ml/min的流速，压力有500bar

应助达人

先用双通代替色谱柱，在不接柱子时看一下仪器的背景压力有多少，有没有堵塞，确定一下压力的来源

应助达人

干嘛要用50：50的比例，这个比例使流动相黏度增大。柱压会很高。

50:50甲醇：水是压力最大的

这个比例混合，压力本来就大啊。你用纯甲醇试一下，如果在5MPa（也就是50bar）以内，还可以用。通常新柱子一般4.2Mpa左右。另外，你说的应该是50bar。500bar不可能，仪器早报警了。超过200bar，普通液相都承受不了。

排一下看看是不是柱子堵了。c18柱一般我们用100%甲醇或者乙腈冲洗的，如果是流动相有盐的话，是用的10%乙腈缓冲。