【求助】阿奇霉素相关物质的分离制备

阿奇霉素中相关物质的分离和鉴定
http://www.cqvip.com/qk/93340X/200305/8531979.html
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采用 HPLC法分离和制备阿奇霉素中的相关物质,色谱条件:采用 Luna C18(2)制备柱 (10μ m, 10mm× 250mm);流动相:甲醇-水( 92∶ 8);流速: 5ml/min;柱温:室温;检测波长为 215nm,进样方式为自动进样.用抗生素微生物检定法测定其体外抗菌活性.结果从阿奇霉素原料中分离出四种相关物质,其相对含量分别为 0.3％、 0.5％、 0.4％和 2.6％;其体外抗菌活性测定表明四种相关物质的效价分别为 59、 155、 34和 965μ g/mg.结论有关药厂有必要控制阿奇霉素中相关物质的含量.
http://www.ilib.cn/A-zgksszz200401015.html
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方法采用Luna C18(2)柱,以甲醇-水(92∶8)为流动相,检测波长215nm,外标法测定含量,面积归一化法测定相关物质
http://www.ilib.cn/A-zgxdyyyx200305021.html
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采用现代色谱技术分离相关物质,用化学方法和现代波谱技术(UV,IR,MS和NMR)鉴定相关物质的结构.结果从阿奇霉素中分离得到4个相关物质,其中一个被鉴定为9-脱氧-9α-氮杂-9α-甲基-9α-红霉素B.结论 4个相关物质均为首次从阿奇霉素中分离得到,但其中3个有待进一步纯化和鉴定.
http://www.ilib.cn/A-hxyxzz200305002.html

建立用HPLC分离测定阿奇霉素的含量及其相关物质的方法.方法采用Luna C18(2)柱,以甲醇-水(92∶8)为流动相,检测波长215nm,外标法测定含量,面积归一化法测定相关物质.结果线性范围9.3～41.9mg/mL(r=0.99992),重复性试验的相对标准偏差小于1.0%.结论方法简便、快速、准确,适用于阿奇霉素的质量检查.

楼上的方法挺好的,考虑到大分子物质的分离速度,楼主做时也可适当把柱温控制高点,分离速度会快点.

很有帮助，谢谢啦

利用简单流动相组成测定阿奇霉素及其相关化合物的反相高效液相色谱法,色谱柱为Inertsil ODS-3(150 mm×4.6 mm, 5 μm),流动相为乙腈-水(90∶10,V/V),流速0.8 mL/min,柱温30℃;紫外检测波长为205 nm.能够明确地分辨阿奇霉素粗品中5种物质:红霉素6,9亚胺醚、红霉素9,11亚胺醚、阿奇霉素前体、甲基化硼酸酯和阿奇霉素.该方法简便快捷,线性关系良好,结果准确可靠,对阿奇霉素合成工艺优化和成品的质量检测均具有指导作用.
http://scholar.ilib.cn/A-fxhx200504020.html

阿奇霉素为15元环新型大环内酯类抗生素,结构上与红霉素类似,不同的是内酯环的9α位上有甲基氮.阿奇霉素的作用机理与红霉素相似,通过抑制细菌蛋白质的合成而起作用,且具有抗菌谱广、不良反应小等优点[1].在传统生产工艺中,将阿奇霉素直接与强酸溶液反应生成阿奇霉素盐.而阿奇霉素在强酸(如浓HCl,浓H2SO4)条件下不稳定,因此易使阿奇霉素遭到破坏,而相关物质增加[2].目前国内研制的供静脉给药的四类新药盐酸阿奇霉素,采用新的工艺技术,将阿奇霉素溶解于低级(C1-C4)醇或低级(C3-C6)酮中,低温下通入HCl气体,通过严格控制反应条件获得稳定的阿奇霉素盐酸盐.
http://scholar.ilib.cn/A-zgyaokdxxb200601021.html

建立用HPLC分离测定阿奇霉素的含量及其相关物质的方法.方法采用Luna C18(2)柱,以甲醇-水(92∶8)为流动相,检测波长215nm,外标法测定含量,面积归一化法测定相关物质.结果线性范围9.3～41.9mg/mL(r=0.99992),重复性试验的相对标准偏差小于1.0%.结论方法简便、快速、准确,适用于阿奇霉素的质量检查.
http://scholar.ilib.cn/A-zgxdyyyx200305021.html

比较了多种阿奇霉素的薄层色谱条件，确定了分离效果较好、Rf值适宜的展开系统和灵敏度较高的显色剂，设计了系统适用性实验方法和三个浓度的对照品，从而确定了较理想的阿奇霉素及有关物质薄层色谱检测法。市售硅胶G预制版，展开剂为乙酸乙酯-正乙烷-二乙胺(5∶5∶1，v/v)显色剂为苯酚3g、硫酸5ml、无水乙醇95ml混匀，均匀喷至板上后80℃加热数分钟。该法灵敏度高，分离效果好，特别是系统适用性实验和多浓度点对照液的设计，弥补了薄层色谱法测定阿奇霉素及其有关物质时结果的准确性易受薄层色谱条件影响，且量化功能较差的弱点，具有一定的特色。
http://scholar.ilib.cn/A-zgksszz200103019.html

阿奇霉素有关物质分析方法对色谱填料的要求

目前2005版中国药典对阿奇霉素相关物质的测定采用薄层色谱法（TLC），对含量的测定是采用微生物检定法，方法的专属性不好。USP以及欧洲药典现行分析方法是采用液相色谱法。

以下是Waters公司实验室根据欧洲药典的HPLC方法分析阿奇霉素相关杂质所得到的色谱图（阿奇霉素以及15种杂质完全分离）：


色谱条件：
色谱柱：XBridgeTM C18 4.6mm ×250, 5 µm




检测波长：254nm

同时国家药监局对于阿奇霉素两种注射液有关物质检查项进行了修订【请参考“关于修订阿奇霉素氯化钠注射液和阿奇霉素葡萄糖注射液药品标准有关事宜的公告(国食药监办[2007]334号)”】，修订后的检验方法也是采用液相色谱法，流动相pH值为8.2，方法中推荐使用的色谱柱为XBridge Shield RP18。