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实验室里的困惑
日山
2023/10/16
私聊
原创大赛公告
实验室里的困惑
十多年前的事了。当时我们疾控中心检验科理化实验室每天承接的要求做铅含量测定的尿样标本比较多,作为科长,看到同事每天用化学法(双硫腙比色法)做的比较辛苦,就想用一种更先进的
原子吸收
石墨炉法来代替,于是我召集骨干来集体攻关。
大家商量的结果,觉得先用标准加入法直测,看有什么问题。因为教科书上说,该法能有效除去复杂基体的干扰,尿样不就是复杂基体吗?如果其斜率成直线,相关系数达0.998以上,再将结果减去空白值后即可计算出尿中铅含量来。第一步直测尿样中铅,取1,2,3,4号管,各加入5ml同一份尿样,各加入铅标准使稀释后铅标液的浓度为0.0,20.0,40.0,80.0ng/ml,均用稀硝酸稀至25ml,上机测定。1,2,4管峰高值虽不理想,但也是逐步增高的,理论上也说得过去,3号管峰高竟低于1号管,理论上怎么也说不通的。我更换了一个石墨管,又核查了一遍参数等仪器工作条件,再测,结果仍同前。我瞄了一眼身边加配试剂的同事一眼,说,是不是铅标准液加错了或是管号弄错了。同事委屈地辩解,我也知道结果出了问题,但绝不会是加错标液或弄错管号!我说,那就再看看空白值如何吧,低于2
0
.0
ng/ml样管,
高于40
.0
ng/ml样管,怎么解释?
我还是不相信她的说法,用5ml纯水代替尿样,其管号及步骤、操作同前,所得结果出奇的好,成一直线,相关系数达0.999以上。再用尿样试一试,我对同事说,不过加入的标准量改一改,改成0.0,40.0,80.0,120.0ng/ml的铅含量浓度,看有什么变化。结果却是2号管峰高低于1号管,也就是空白管还是高于
40
.0
ng/ml样管,
3、4号管峰高基本正常。实验结束的时候,我半是总结地说,尿样单单能使40ng/ml的铅标液石墨炉峰高下降,这是一个奇怪的问题,有待研究。
以后我们又参考其它的资料,实验了其它的方法,成功地用原子吸收石墨炉法代替了化学法,但实验中遇到的这个奇怪的问题一直困惑着我。也许有专家会解答吧。
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