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液相使用过程中常见问题分享2
通标小菜鸟
2023/10/31
菜鸟分析队
私聊
液相色谱(LC)
液相
使
用过程
中常见问题分享2
1.流动相的使用注意事项有哪些?
日常使用的流动相主要分为有机相和水相,在有机相的选择上,建议购买HPLC级别的试剂,不建议为了省几个钱购买低级别的试剂。对于水相,可以使用实验室纯水机自制的纯水。不管是有机相还是水相,在上机前都建议使用0.45um或者0.22um微孔滤膜进行过滤以去除试剂中可能存在的颗粒物,如果不这样做,在使用过程中,系统压力可能会随着时间的积累而慢慢升高。在流动相有效期方面,建议水相现配现用,存放于棕色瓶中进行避光存储,以免长菌,每天更换新的水相,在不使用水相通道的时候可以将其换成有机相并充分灌注管路替换水相。如有机相使用到乙腈,也需要将乙腈存储于棕色瓶中避光,因为乙腈在适宜的温度和光照作用下会聚合成絮状聚合物,一旦进入
液相
系统后会附着在系统内,所以有用到乙腈的也需要注意。
2.
液相
流动相中如使用缓冲
盐需要
注意哪些问题?
使用
缓冲盐那必然
会用到各种缓冲盐试剂,缓冲盐试剂有固体有液体,一般来说使用的缓冲盐试剂等级为分析纯的比较多,那就意味着试剂中可能存在一定量的固体颗粒及杂质,因此在用到缓冲盐时也需要对混有缓冲盐的流动相充分过滤并超声溶解加脱气。有些分析员可能会为了图方便,一次性配制很多缓冲盐流动相放在那边,然后仪器上走的差不多了再将之前配制好的拿出来加入流动相瓶中,这种做法不推荐,最好还是现配现用,每次用完了再进行配制。在使用缓冲盐时,建议固定放在某个通道,比如固定放在C通道,这样每次走完样品,对C通道进行一个充分得冲洗,避免盐类物质在管路内析出造成压力升高堵塞。
3.流动相超声脱气过程中有哪些注意事项?
使用的流动相上机前推荐进行超声,超声建议放在玻璃瓶内进行超声,不建议放在塑料容器内超声,一是因为塑料瓶内超声没有玻璃瓶效率好,还有一点是因为使用的塑料器皿假如质量不好,而超声的流动相中又有有机试剂,可能会将塑料器皿中的一些杂质溶出,可能会在分析过程中出现异常出峰。流动相超声时间不宜过长,5~10min比较合适,长时间超声会造成温度升高,可能会导致流动相组成发生变化。
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