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【金秋计划】EMB培养基鉴别原理和注意事项

王小盒

2024/09/05

食品常规理化分析

EMB( eosin-methylene blue)培养基，又叫伊红美蓝培养基，是一种鉴别培养基，供沙门菌属及志贺菌属鉴别用，如大肠埃希菌、变形杆菌、产气杆菌等。又是伊红和美蓝。

1.EMB鉴别原理

EMB培养基中的伊红和亚甲蓝两种苯胺染料可抑制G⁺细菌和一些难培养的G^-细菌。在低酸度下，这两种染料会结合并形成沉淀，起着产酸指示剂的作用。

因此，试样中多种肠道细菌会在EMB培养基平板上产生易于用肉眼识别的多种特征性菌落，尤其是E.coli，因其能强烈分解乳糖而产生大量混合酸，菌体表面带H⁺，故可染上酸性染料伊红，又因伊红与亚甲蓝结合，故使菌落染上深紫色，且从菌落表面的反射光中还能看到绿色金属闪光。

肠道致病菌因不分解乳糖或蔗糖，形成透明无色的菌落；变形杆菌则形成橙色孤立菌落，菌落周围培养基变色，其他菌落周围，培养基无变化；产气杆菌为大而黏性的菌落，中心小而暗黑色或黑色，很少见金属光泽。

2.EMB成分

2%无糖琼脂100mL，2%伊红Y水溶液2mL，0.65%美蓝兰水溶液1mL，乳糖1g

蛋白胨提供碳源和氮源；乳糖是大肠菌群可发酵的糖类；磷酸氢二钾是缓冲剂；琼脂是培养基凝固剂；伊红和亚甲蓝是抑菌剂和pH指示剂。

3.EMB培养基制法

在无糖琼脂内加入乳糖，加热融化（pH=7.6），冷至50℃左右时，加入经高压灭菌的伊红及美兰溶液，混匀后，倾注平板。

4.注意事项(1) pH不要调过头，以避免回调而影响培养基内各离子的浓度。

(2)严格按照培养基配方配制。

(3)高压灭菌需彻底，保证无菌状态。

(4)EMB培养基除有鉴别不同菌落特征的作用外，同时兼有抑制G⁺细菌和促进G^-肠道菌生长的作用。

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