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【金秋计划】培养基配制过程中的常见问题分析
王小盒
2024/09/05
私聊
食品常规理化分析
培养基配制是微生物检验的基础步骤,但这个过程总是问题频发,本文对收集到的常见问题进行分析解答.
培养基颜色不正确的原因分析
01
含有酸碱指示剂的培养基,若颜色不正确,通常是由于pH不正确导致的,加热过度、错误的灭菌方式等都会导致此项问题。
02
加热过度导致某些成分分解或糖焦化,如SC培养基加热过度会变红,含糖量高的培养基,加热过度通常会出现颜色加深,呈焦糖色或棕褐色。
03
某些成分变质,如血液久置易变黑,制成的平板颜色偏棕黑色。
二
培养基不凝固或凝固性差原因分析
1)称量错误
2)琼脂分布不均匀
3)培养基pH不正确
4)加热过度
5)琼脂量不足
三
培养基产生沉淀的原因分析
01
某些培养基原本就含有不溶性沉淀,如TTB,MC培养基等,配方中含有大量不溶性碳酸钙。
灭菌前未充分溶解,如Fraser培养基中含有大量磷酸盐,若灭菌前溶解不充足,灭菌后就会出现大量沉淀。
02
pH不正确,偏酸或偏碱都有可能使培养基中的部分金属离子产生沉淀。
水的纯度不够,天然水中含有较多的矿物盐离子,若未除净,则易与培养基中的磷酸盐反应生成沉淀。
03
添加剂加入温度不正确,卵黄、血液等对温度敏感的添加成分,若加入时温度过高或温差过大,易出现凝块。
称量错误。或是试剂加入顺序不正确导致。
四
导致培养基污染的原因分析
1)灭菌方式不正确,导致灭菌不彻底
2)灭菌锅的灭菌效力不达标
3)灭菌量过多,灭菌前未加热溶解
4)培养基本身含耐热菌较多
5)灭菌过程中,灭菌锅内冷空气未排干净
6)灭菌锅放置过满
7)操作过程发生污染
8)分装培养基器皿灭菌不充分
9)滤膜破损
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