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【讨论】有关HPLC梯度洗脱的问题

Ray

2007/12/15

液相色谱（LC）

有个疑问，梯度洗脱只适用于成分极性差别较大的？还是极性相近的也可以？间论坛上有很多同仁讲到“当样品峰保留时间相差太远或分不开时用梯度洗脱”，样品峰系性差别很大时用梯度洗脱使分析时间缩短完全可以理解，但若有一堆的峰分不开怎么去用梯度洗脱把它们分开呀，我做实验时也遇到过这样的问题：在30多分钟有五六个峰分不开，我的流动相是乙腈-水。梯度洗脱时流动相中逐渐加大乙腈的含量是没有错的吧。望各位高手专家指点一二！！

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xiaoxiao118

第1楼2007/12/15

我刚涉及这方面工作，说点自己的见解，期望能够抛砖引玉。如果峰离得很近，可以选一个合适的比例，等梯度洗脱，或是小梯度变化之下延长洗脱时间。

0

It is me!

第2楼2007/12/16

已经梯度很容易产生杂峰，不知你说的5/6个峰是不是样品中物质引起的？
在产生很多峰的地方，减缓或等梯度尝试一下

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