【求助】极性很小了还是不能把两个接近的峰时间拉长怎么办呢？

应助达人

最把你做的是什么说一下，样品的性质等，流动相比例，选择柱效更高的色谱柱，如果这两种物质，有一个对温度较敏感的话，可选择进行柱温控制，用的是反相柱吗？

乌头碱，新乌头碱，次乌头碱，新乌头碱最先出峰，没有问题，主要是乌头碱与此乌头碱出峰时间很接近。用40mmol醋酸铵A+ 乙腈B 30%洗脱，或者20-50%B洗脱30min内都出来了，就是无法拉长时间距，已经没法再减小极性了。色谱柱的话文献有人用同样型号的柱子分的很开，流动相也是这个，Eclipse XDB-C18 。

把乙腈的量再减少试试

两个峰分开了，为什么出峰时间没拉开？楼主是不是说两个峰的保留时间很相近？
有些性质相同的物质是比较难分离，作实验也不可能十全十美，楼主也不要要求的太苛刻！

只要分离对象基线分离就ok，不一定要求把它们的保留时间拉开吧？

应助达人

只要分离度和柱效达到要求就好,有一些方法本来就不见的就是最佳的,或是你换一根好的柱看看,30%乙腈还可以降,如果没有有机相的话,走出来的结果怎么样?把柱温升高或降低看看.

乙腈的比例再降一些可能会分得更好，不过保留时间会变长

了解一下,这两个物质的理化性质的差别,再改换一下条件试试,换一根更长的柱子.如果要求不是很严格的话,两个峰能够分开也就可以啦.

需要的话和我联系这个实验我作过,分的很好,109859271