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【求助】急,液相新手求助,万分感谢

液相色谱(LC)

  • 以下是我刚跑的一个梯度洗脱的液相图谱,一个八味药组成的复方醇提物,需要对这张图中保留时间为18.632的峰进行含量测定和含量测定方法的方法学考察

    请问各位大大,怎么能让那个峰落到基线上,怎么调整条件,能让那个峰与边上的峰分开,提高分离度,因为刚用液相,请问我做的这个梯度有什么毛病?非常感谢

    柱温25,那个峰是芦丁,我用的检测波长是360,我刚试验时候跑的梯度如下:

    甲醇 水

    起始 30 70
    15min 57.8 43.2
    30min 65 35
    40min 100 0
    45min 30 70
    55min stop

    梯度都是连续变化的,不是瞬间改变,下边是图

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  • 有水有渝

    第1楼2009/04/10

    应助达人

    看不到图谱

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  • ssilienty

    第2楼2009/04/10

    抱歉,漏掉图了,现在好了,实在是新手,请多多帮忙,麻烦好好指点指点我

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  • wyp198

    第3楼2009/04/11

    不知道楼主用DAD扫那个化合物的最大吸收波长了吗?我们现在主要研究的是那个化合物,看一下它的最大吸收,让它的出峰显著一些,看看可以吗.

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  • ssilienty

    第4楼2009/04/11

    嗯,拿紫外扫过标准品,356nm是最大吸收,请教下怎么调流动相能把那些挤在一起的峰拉开

    wyp198 发表:不知道楼主用DAD扫那个化合物的最大吸收波长了吗?我们现在主要研究的是那个化合物,看一下它的最大吸收,让它的出峰显著一些,看看可以吗.

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  • 知足常乐!

    第5楼2009/04/11

    把起始的甲醇:水改成10:90试试

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  • ssilienty

    第7楼2009/04/11

    扫的是保留时间18.632的那个峰,因为没有DAD检测器,只在相同的条件下进过一次标准品,标准品是芦丁

    拿专门的紫外检测器扫了芦丁的吸收波长

    zhuxinchun1979 发表:不知道楼主用DAD扫那个化合物的最大吸收波长

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  • ssilienty

    第8楼2009/04/11

    谢谢,我这就去试试,请问能告诉我改成10:90是为什么吗,非常谢谢

    wenshaowei-2008 发表:把起始的甲醇:水改成10:90试试

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  • flame_2007

    第9楼2009/04/11

    把芦丁出峰那段时间的梯度改变速度变小点,就是把梯度时间设长点,看下能不能分开把它和周围的峰分得开点
    一般都是这样

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  • flame_2007

    第10楼2009/04/11

    你说的那个基线的问题,因为是梯度洗脱,基线向上飘是一定会的,没办法,你的情况也不太严重,还有看下积分软件那里可以设置那个时间段开始积分,也是可以解决的

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  • flame_2007

    第11楼2009/04/11

    N2000的图谱在积分上是可以设的,好好摸一下那个软件,很容易的

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