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【求助】两个峰靠的很近分不开 头大了 各位帮忙啊

液相色谱(LC)

  • 液相新手 接触半个月
    测西洋参皂苷含量 用的流动相是水和乙腈 甲醇溶剂
    跑出来总有个干扰峰 或前或后或重叠 应过离子对试剂磷酸氢二钾。效果还不如不加的,明天打算加TFA 试试看再不行要跳楼 ,梯度洗脱比例换了也不少
    那个峰一直分不开 各位大虾有没遇到这种情况 有没好点的办法 跪求!!!

    我流动相A乙腈。B纯水。开始10分钟是25:75 。 10到30分钟34比66. 30分钟以后一直是34比66.可把骑峰了。本还想试试30分钟后把乙腈比例调低点分的更开。就怕这样做不被承认,不知大家有没这样试过的?
    不过今天做标准曲线 第一针还非常好 后面的都是馒头峰了,郁闷,浓度比药典的低很多,进样量也就10UL 不知道什么原因了 ? 大家帮忙下啊
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  • hahahe

    第1楼2010/01/04

    测这种东东有标准方法的,如果有标准方法出鬼峰,可能是你用的试剂不纯

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  • mayizi

    第2楼2010/01/04

    里面的人参皂苷,梯度洗脱的话,流动相比例按照中国药典标准就可以,关键是柱子。以前试过,中间一段分离度始终不是很好,但不影响结果。柱子要长的,并且比较新的柱子,效果会好点。

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  • 有水有渝

    第3楼2010/01/04

    应助达人

    流动相调整没有效果,有没有换过色谱柱试试。

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  • Tinacrysta

    第4楼2010/01/04

    人参皂苷含量测定是不太好做,不过照药典方法或稍作调整还是可以的,柱效一定要好,前处理也要注意一下。再试试,别着急啊。

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  • 雪在烧

    第5楼2010/01/04

    我们一直没有这种情况,峰分的不好是不是调节一下仪器条件。

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  • shenchang

    第6楼2010/01/04

    谢谢大家了啊
    C18 500*4.6MM的柱子 应该算最长的那种了吧 是根据药典做的 不行 主要不是单一人参皂苷 里面还有黄芪皂苷
    不过今天小修改了梯度 峰前5分钟 开始以保持不变的梯度洗 分得蛮好的了

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  • 20100103

    第8楼2010/01/05

    人参皂苷含量测定我们作三七的时候也检测过。确实不好作,进一针就要一个小时,而且峰形也不太好。不过分离的还不错。

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  • qinsisen

    第9楼2010/01/05

    呵呵
    我也遇到类似的情况

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  • 天天洗碗

    第10楼2010/01/05

    梯度洗脱是个好方法啊

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