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【求助】色谱峰变矮变胖了该怎么办?

液相色谱(LC)

  • 求助~~~~~我的色谱图变得很怪,峰都变胖变矮了,而且不同峰之间的分离度也变差了。上午走的时候还好好的,峰都很尖,中午换另一种流动相跑了一轮,然后刚才再换回原来的流动相,图就变成这样了,。。。请问,为什么会这样?我该怎么做才能让峰型变回回原来的样子呢?谢谢!
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  • marsio

    第1楼2011/03/04

    先测定一下流速是否准确,再看看氘灯的能量值。这两个如果都没问题,应该就是柱子的事了,有可能填料塌陷或其他原因

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  • glowyouth

    第2楼2011/03/04

    嘿嘿 ,这个遇到过! 柱效变差了,原因是柱子污染,柱头堵塞,键合变差了!好好冲冲!

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  • 有水有渝

    第3楼2011/03/04

    应助达人

    色谱柱清洗一下应该就能恢复。

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  • jy010422

    第4楼2011/03/05

    请问,要怎么冲呢?谢谢!!!

    glowyouth(glowyouth) 发表:嘿嘿 ,这个遇到过! 柱效变差了,原因是柱子污染,柱头堵塞,键合变差了!好好冲冲!

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  • jy010422

    第5楼2011/03/05

    请问,要怎么洗呢?谢谢!!!

    有水有渝(xky0230699) 发表:色谱柱清洗一下应该就能恢复。

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  • 有水有渝

    第6楼2011/03/05

    应助达人

    日常检测完成后怎么清洗的就怎么操作,或者可以看看色谱柱使用说明书有没有清洗方面的介绍,按说明书操作。

    jy010422(jy010422) 发表:请问,要怎么洗呢?谢谢!!!

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  • 小卢

    第7楼2011/03/05

    如果不是十分了解的话,建议:
    1.先按照楼上版友的建议依次排查以下问题:
    a、流动相污染,是否严格按照规程配比、调ph、过滤等;
    b、氘灯,能量下降,但我认为可能行不大,因为你上午还是好的;
    c、流路,是否是滤芯、预柱、保护柱等有污染(空走流路看压力是否增大很多);
    d、色谱柱被污染(如果流路压力不高,那么看柱子压力情况,如果增大很多,说明被污染)

    2.找到原因后,开始排查,但建议一定要按照以上步骤一步一步排查;
    如果怕麻烦也可以一次性把该换的换了、该试的试了,但这样的话对于查找具体原因不利。

    3.如果色谱柱被污染不严重,可以建议这样冲洗:
    先把流路冲洗干净后,把柱子反向直接连上,但柱后不接检测器,直接到废液,
    用90%的甲醇或乙腈(或合适溶剂),以0.2-0.5ml/min的流速冲洗8-12h(过夜即可)。
    如果此方法不可行,可以按照说明书上的办法用异丙醇再生(如果无色谱柱厂家工程师指导,建议不要自己做)。

    4.以上办法后,柱子还不行的话,一定是被污染太严重,建议报废。

    jy010422(jy010422) 发表:请问,要怎么洗呢?谢谢!!!

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  • xhwy2010

    第8楼2011/03/06

    建议如果是C18先用纯甲醇冲一小时后再换为原来的流动相,比较保守的方法。我原来遇到过类似的情况。楼主可以试一试,如果此方法不行就麻烦了。

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  • leisa_abc

    第9楼2011/03/06

    C18先用甲醇冲一小时后再看,再看看你配的流动相是否规范

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  • nicotine

    第10楼2011/03/06

    先用甲醇反冲一小时,流量0.8;再用水冲,然后反过来再冲一次

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