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【讨论】ODS-C18柱效下降,怎么办?

液相色谱(LC)

  • 我用C18柱测定发酵液中的有机酸,发酵液有稀释100倍经膜过滤的,但最近一段时间,色谱峰保留时间普遍向前移,且分离不是很好,请问要怎么处理?反冲的话用什么溶剂,流速多少?我现在洗柱子是用甲醇。可以再生不?请各位大侠指导。
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  • 有水有渝

    第1楼2011/03/27

    应助达人

    用的流动相是什么,一般反冲可以用50%乙腈,低流速,色谱柱不接入检测器。

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  • kellyfilm

    第2楼2011/03/27

    我用的流动相是3%甲醇+0.05%磷酸

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  • xhwy2010

    第3楼2011/03/28

    你的流动相中甲醇含量有点低,如果不是耐水的AQ色谱柱,恐怕你的流动相会对柱子有损害,你可以用AQ色谱柱来做此样品或将有机相的比例调高到5%以上,但如果经常做此样品,还是建议换柱子。至于保留时间提前,先用3%甲醇冲掉磷酸,再逐渐过渡到纯甲醇冲洗,每次做样完毕都要经过此过程。

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  • 〓猪哥哥〓

    第4楼2011/03/28

    3%的甲醇没有看懂。水不是用来溶解磷酸的吗。
    楼主先观察下压力是否比以前低了,可能情况没那么糟,把前后的图谱上传一下再分析

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  • 知足常乐!

    第5楼2011/03/31

    LZ这种情况是相塌陷造成的

    对柱子没有损伤,只是碳链发生了紊乱,用有机相好好冲洗维护一下就可以了

    kellyfilm(kellyfilm) 发表:我用C18柱测定发酵液中的有机酸,发酵液有稀释100倍经膜过滤的,但最近一段时间,色谱峰保留时间普遍向前移,且分离不是很好,请问要怎么处理?反冲的话用什么溶剂,流速多少?我现在洗柱子是用甲醇。可以再生不?请各位大侠指导。

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  • hanchunhuily

    第6楼2011/04/02

    反冲估计不用了,你把磷酸换成纯水洗大约20倍柱体积后,用高有机相洗一天柱子估计就能好。
    你的柱子在高水相中泡太久了,固定相碳链排列乱了 。

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