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【求助】HPLC检测条件选择问题，谢谢！

qiulfei1010

2011/04/07

液相色谱（LC）

在做方法验证时对一些问题不太很清楚，指导原则上也是模棱两可，在此和大家讨论一下，请大家多指点，谢谢！

1、耐用性：有没有规定具体要做几种色谱条件，还是从流速、柱温、比例、pH等条件中随便选几个条件就可以了。
换色谱柱的话，流动相条件需要考察几个？换几根柱子？
采用什么样品做？（供试品溶液or系统适用性溶液or others？）
如何评价耐用性结果？（分离度是否合格？杂质种类有无变化？杂质含量有无变化？如果要考察杂质含量的话，是不是也要按外标法或自身对照来做，工作量会不会太大了）
2、LOD、LOQ采用什么样品做？对照品or供试品？
3、回收率：加样回收率能否向空白中加80%、100%、120%的已知纯度的原料药来做？对照品太贵了。
4、中控液相方法验证着重于什么？因为中控方法主要用归一化定量，对于方法的线性、准确度是否有必要验证？
请大家各抒己见！

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有水有渝

第1楼2011/04/07

应助达人

1、耐用性一般考察色谱柱（2-3根），0.1个ＰＨ变化，可以用样品溶液做。分离度是否合格？杂质种类有无变化？杂质含量有无变化？都是考察内容，工作量再大也得做。

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