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液相色谱柱冲洗问题

液相色谱(LC)

  • 问题是这样的,昨天做样品,因为样品比较杂,可能柱子有些污染,然后做完样用甲醇冲洗了一个小时左右关机。今天早上开起来,我先用100%冲洗,230nm波长监测,流出了一个很高的峰,有1000nau,然后基线斜着上升,上升缓慢,我想柱子可能脏了,通常我都是纯甲醇冲一会,再换甲醇水,再换纯甲醇这样交替冲,今天也这样,换成了70%甲醇和水冲洗了一会,然后又换成纯甲醇,发现又有这个峰出来,然后一上午都是70%甲醇水,换纯甲醇,每次换到纯甲醇都会出来这个峰,不下10次了,这个峰貌似还不会降低的,哪个高手帮忙分析一下是什么原因?以前从来没出现过这个情况的。
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  • yangxuri

    第1楼2012/01/11

    在70%甲醇水的条件下是不会出来的,换成 100%甲醇 就出来了,出来之后基线就平了,冲多久也不会出来,只是换成甲醇水后再换纯甲醇又出来了。

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  • 有水有渝

    第2楼2012/01/11

    应助达人

    进样器或色谱柱有残留,分析样品时用的是什么流动相,建议充分清洗一下流路。

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  • yangxuri

    第3楼2012/01/11

    分析样品用的70%甲醇水。我也估计是残留,可是为什么一换流动相就会冲出来,还不见降低?为什么纯甲醇冲出来一个峰以后再就不会冲出来,非要加水冲一段时间再换成纯甲醇才回出这个峰?

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  • dxdong

    第4楼2012/01/11

    峰是不是都是一样高 没什么变化?
    如果没变化就不是污染 污染的话就会降低的
    应该是改变流动相造成的 检查一下流路看看

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  • yangxuri

    第5楼2012/01/11

    峰确实不会降低的,时高时低,没有那样慢慢降低的趋势,以前我也经常这样甲醇水换成纯甲醇反复冲洗的,从来没见过这样的峰,而且这个峰很高哎,还有没有别的原因呢?我想不出。

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  • yangxuri

    第6楼2012/01/11

    该不会是哇哈哈水里面有强保留的物质吧?

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  • yrp1987

    第7楼2012/01/11

    很可能是水那路出问题了,你可以将甲醇和水都换成新的试试,也可以将水和甲醇混匀后再走。

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  • yangxuri

    第8楼2012/01/11

    嗯,我刚换了,还在观察中~~~

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  • yangxuri

    第9楼2012/01/11

    [重新更换了水和甲醇,甲醇水和纯甲醇交替冲洗,发现那个峰还是存在,不过小了好多,现在只有几十mAU了

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  • happy爱米粒

    第10楼2012/01/12

    楼主的色谱柱确实挺脏的了,怎么跑流动相都有这么多杂峰?

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