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第3楼2012/07/12
把所有出峰的组分含量之和按100%计的定量方法,称为归一化法。
由于组分的量与其峰面积成正比,若样品中所有组分在一个分析周期内均可流出色谱峰,并被检测器检测到信号,则可用归一化公式进行计算.
外标法又称标准曲线法或直接比较法,属于绝对定量,其操作如下:
1. 用已知的标准品配成不同浓度的标准样,测量各种浓度的峰高或峰面积,绘制响应信号与浓度的关系曲线;
2. 在完全相同的条件下,测量样品的峰面积或峰高,在校正曲线上查出其对应的浓度。
要求:进样量、色谱分析条件严格不变;可以得到待测组分的标样.
内标法是选择合适的物质作为内标物,将其定量的加到样品中作为待测组分的参比物,根据待测组分和内标物的响应值(峰面积或峰高)之比及内标物加入的量算出待测组分的含量.
校正因子:由于检测器对不同物质响应不同,当两峰的峰面积或峰高相等时,它们对应的两个物质的质量或浓度不一定相等;反之,两个不同物质即使质量或浓度一样时,在色谱分析时得到的峰面积或峰高也不一定相等,此时即使是混合物中所有组分均出峰,各组分的峰面积或峰高在总峰面积或峰高中所占的百分数,也不等于该组分在混合物中的百分含量,这就需要在计算时,对峰面积或峰高进行校正,使得其数值与实际值对应,故引入校正因子,校正因子分为绝对校正因子和相对校正因子,我们平时所说的校正因子多指相对校正因子。
归一化法给出的是组分的相对百分含量,外标法属于绝对定量,内标法是相对定量。
归一化法和内标法计算公式中均有校正因子,但是通常采用归一化法定量计算的时候认为各组分的校正因子近似相等,所以归一化法得到的只是比较粗略的百分含量。