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液质系统双酚A(BPA)空白干扰峰的解决方案(续)

  • 小猪飞飞
    2012/08/30
  • 私聊

液质联用(LCMS)

  • 液质系统双酚ABPA)空白干扰峰的解决方案(续)

    在做BPA项目时,会出现因液相色谱仪中的塑料管路或接头,在有机相的冲洗下,在样品BPA出峰位置出现干扰峰的情况。因此,针对此问题进行了相关的探索,目的是将干扰峰与目标峰分离或者使得干扰峰消失。


    去年我写了一篇关于水中双酚ABPA)测定时,解决液质联用仪存在空白干扰的经验分享(链接:液质系统双酚ABPA)空白干扰峰的解决方案http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20111221/3731068/)。当时采用等度洗脱,使得系统中塑料溶出的BPA不会被洗脱,从而不会产生空白BPA干扰的峰。但这个方法适合于分析单一组分,如果需要分析多组分,或者遇到比水样更复杂的样品,可能就需要梯度洗脱,以达到杂质与待测物分离、减少分析时间的目的。在之前的叙述中提到采用双柱实现液相系统中的BPA与样品中BPA分离的方法,一直未尝试,直至近期才实践了一下,感觉效果不错,在此与各位版友分享,望提宝贵意见。

    所用仪器液相色谱1290,采用梯度洗脱,发现BPA出峰时间较早,保留时间为1.79min,且只有一个峰,标准溶液出峰时间与空白溶液出峰时间一致。尝试更改流动相条件,没有得到改善。



    流动相梯度:A为水、B为乙腈(下同)


    乙腈水的空白溶液图谱


    2ng/ml的标准溶液图谱


    通过改变流动相不奏效,于是加上了一根c8的色谱柱,位置在泵后、六通阀之前。



    装在泵之后的C8色谱柱



    正常安装在柱温箱的C18色谱柱


    在同样的流动相条件下,进标准品溶液,发现保留时间后移。猜测可能是由于C8的保留,使得系统中的BPA保留时间后移,但从图谱中可看出峰底部有小杂峰的出现,难道是确实有两个来源的BPA



    于是,更改流动相条件,梯度如图,主要增加了高水相洗脱的时间。



    在此条件下,分析10ng/mlBPA标准溶液,其保留时间延后,为2.98min,同时在BPA右侧出现一个明显的小峰,但尚未达到基线分离。





    在同样的条件下,分析空白溶液,可发现出现了3.12min的峰,正好对应着上图中的小峰。由此可推测,2.98min的是样品中的BPA,而3.12min的是液相系统中的BPA


    再继续更改流动相条件,可以发现分离度得到进一步提高。



    BPA的出峰时间达到5.06min,比一开始流动相梯度的1.78min要晚了3分多钟。但为了达到和系统中BPA的分离,时间长一点也可以。



    以下是做的有关BPASPE小柱,上样后的洗脱实验。1ml 1:1的乙腈水、6ml洗脱液乙腈,每加1ml就接收一次收洗脱液,考察BPASPE富集后的流出曲线。




    1:1的乙腈水,几乎没有BPA被洗脱下来。



    1ml乙腈,BPA量很多,系统中的BPA的峰响应相对很低。



    2ml乙腈,BPA流出量明显降低,系统中的BPA的峰响应相对较高。



    3ml乙腈,几乎没有BPA流出,只有系统中的BPA的出峰。即BPA几乎在1~2ml乙腈全部流出。

    同时分析的还有其他物质,这是五种物质的TIC图谱,相比较而言,通过在泵前加一根C8(C18的效果应该会更好些)色谱柱、更改流动相洗脱程序的尝试,使得系统中塑料管路、接头中被有机相溶出的BPA能够与样品中的BPA完美地分离开来,使得在分析样品时能够准确的定量分析,尤其是分析低含量样品时。相对之前用过的等度洗脱的方法,该方法能够同时分析多组分,有效地提高了工作效率。


    液质联用仪的灵敏度高,但也有其不足之处,如液相系统中双酚A的溶出,又如增塑剂,塑料管路中同样存在,如果要用液质系统分析的话,不知能否用本文介绍的方法加以避免,或者有没有其他的更好的方法,欢迎各位版友尝试、分享!
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  • dark_wzy

    第1楼2012/08/30

    这个解决方案好像很多仪器厂家都已经推过了,思路一样的。

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  • happy爱米粒

    第3楼2012/08/30

    装在泵后六通阀前的柱子,第一次见

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  • 小猪飞飞

    第4楼2012/08/30

    是的,不少厂家在接到用户反应后都给出了解决方案,之前一直没试过,最近试了一下,效果的确不错

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  • lczhfj

    第5楼2012/08/30

    7号材质塑料制品含双酚A。

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  • houzhou

    第6楼2012/08/31

    很棒啊,楼主,向你学习啊

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  • 胜邪

    第7楼2012/08/31

    祝贺楼主解决问题!

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  • ilovewater

    第8楼2012/09/02

    超纯水也可能含有大量的双酚A,建议超纯水经过EDS PAK,将超纯水中的双酚A,邻苯二甲酸二乙脂和邻苯二甲酸二丁酯等众多内分泌干扰素去除到PPT级别。从而有效的排除是因为超纯水中双酚A含量太高对实验结果的影响因素。

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  • 小猪飞飞

    第9楼2012/09/02

    我查了一下,EDS Pak是由Merck Millipore开发的一种新型终端过滤器,主要由活性炭组成,可用于去除内分泌干扰物(Endocrine Disrupters, EDs)类特定有机物。产水可用于EDS研究实验中的空白及试剂配制等。

    不知道具体的使用效果如何。另外,我觉得液相系统中的BPA残留更可能来源于管路接头,主要由于高有机相被洗脱下来、从而产生干扰峰。如果是流动相中的BPA,应该一直有背景干扰,或者基线比较高,但从我自己目前的检测灵敏度来看,也不能确定是流动相中的BPA。

    此外,如果是在纯水仪之后装上这种专用过滤器,但如果在后面的流动相配制过程中加入某些盐、需要过滤,那么这种滤膜是不是也要用专用的?

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  • hujiangtao

    第10楼2012/09/03

    应助达人

    这个方法真的不错

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