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DAD的吸光度是否与浓度有关?

液相色谱(LC)

  • 最近做甲醛的HPLC方法时发现,不同浓度的甲醛的光谱图是不一样的,而且一个峰的不同的点的光谱图也是不一样的,所以想问下,DAD的吸光度是否与浓度有关?还是有其他的原因?
    仪器:agilent1260

    流动相:乙腈+水(60+40)

    色谱柱:C18反相柱

    流速:1.0ml/min

    波长:360nm

    甲醛使用2,4-二硝基苯肼衍生。
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  • xiaowang268

    第1楼2013/01/11

    吸光度与浓度没有关系的啊

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  • steven

    第3楼2013/01/11

    确实怀疑过这个问题,但前面衍生试剂的峰就是很纯的,到后面甲醛就这样了。不同位置的图不一样可以说是不纯,但是不同浓度的峰也是不一样的,这个就不知道怎么解释了。

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  • djj85411

    第4楼2013/01/14

    这个应该算正常的:因为衍生产物2.4-二硝基苯腙一般在波长360nm下定量是准确的,360nm处没什么区别啊,你说的光谱不同都是在200nm左右处才有不同,200nm处一点点小小的杂质就很容易引起比较大的吸光度差别,这也正常啊!

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  • djj85411

    第5楼2013/01/15

    另外:楼主你问的应该是化合物的特征光谱图而不是吸光度吧?吸光度是跟浓度有关系的哦。

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  • steven

    第6楼2013/01/15

    嗯,是特征光谱图,是我的说法有误,谢谢纠正。

    特意查了下吸光度定义:

    吸光度(absorbance):是指光线通过溶液或某一物质前的入射光强度与该光线通过溶液或物质后的透射光强度比值的以10为底的对数(即lg(Iin/Iout)),影响它的因素有溶剂、浓度、温度等等。

    djj85411(djj85411) 发表:另外:楼主你问的应该是化合物的特征光谱图而不是吸光度吧?吸光度是跟浓度有关系的哦。

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  • zhx_fs_ln

    第7楼2013/01/15

    应助达人

    DAD测的是溶液的特征谱图,200nm的溶剂吸收就很强了,有点偏差也是正常,应该是浓度大一些的接近真实光谱

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  • houjjun

    第8楼2013/01/15

    是和浓度有关系吧,浓度型检测器嘛

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