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加标回收的问题

  • wanglihua_19
    2013/01/15
  • 私聊

液相色谱(LC)

  • 悬赏金额:10积分状态:已解决
  • 如题,在做VB12的加标回收试验时,做校正曲线还很正常,进样品和加标样品时,响应值不对的,加标的样品比没加标的样品峰面积还低是怎么回事?随着进样的进行,重新进之间进的样品,峰面积也降低很多,不知是什么原因,声明的是,我们产品的VB12很低,所以进样的浓度很低,Waters的工程师说没到定量限,即峰高与基线噪音的比值小于10,我觉得不是这个原因吧,Agilent1260的做完全没有问题啊,望哪位大侠指导下啊!

有水有渝 2013/02/20

应该考虑分析条件对VB12稳定性的影响。 探讨了光照、pH值、温度、金属离子及糖品种类和浓度等因素对维生素B12的影响。光照条件下存放3-10天,葡萄糖等六种糖品的添加对维生素B12都有不同程度的降解,其中低聚半乳糖、低聚异麦芽糖和麦芽糖的作用显著,而在避光存放过程中维生素B12均无明显变化;同一种糖液(葡萄糖或蔗糖),pH值越低,维生素B12降解越快。低pH值(1-3)时,pH值是降解的主要因素,pH值增加到5时,糖类对维生素B12的降解速率起主导作用。5~55℃储藏条件下蔗糖溶液中维生素B12的含量没有明显的减少。Cu、Fe、Zn、K、Na等金属离子对维生素B12影响程度不同,与糖的存在无明显关系。维生素B12的降解速率随着葡萄糖浓度的增加先升(1~5%)后降(5~25%);蔗糖溶液中维生素B12的降解速率也随蔗糖浓度增加先升(1~10%)后降(10~25%)。    维生素B12在糖液中光解生成羟钴胺素,其在葡萄糖、蔗糖、麦芽糖和果糖等几种糖液中的动力学方程为假一级反应。在100%DMSO溶剂中,添加10%葡萄糖的维生素B12几乎未发生光解,而在DMSO-水(8:2,v:v)溶剂中,添加10%葡萄糖时维生素B12的降解速率远低于100%水溶剂中维生素B12的降解速率。    0.1%亚硫酸钠、硫代硫酸钠、硫酸铵、苯甲酸钠和0.01%的亚硝酸钠等食品添加剂对维生素B12没有稳定作用。0.1%的卡拉胶、琼脂、海藻酸钠、黄原胶和瓜尔豆胶等食用胶对糖液中维生素B12也不具保护作用。凝胶态食用胶比液态有利于葡萄糖或蔗糖溶液中维生素B12的保护。卡拉胶凝胶和琼脂凝胶对10%葡萄糖溶液中维生素B12的降解率分别为41.64%、52.74%,低于10%葡萄糖溶液中维生素B12的降解率(56.14%);卡拉胶凝胶和琼脂凝胶对10%蔗糖溶液中维生素B12的降解率分别为19.03%、8.52%,低于10%蔗糖溶液中维生素B12的降解率(21.61%)。

三人行 2013/03/24

称量用棕色容量瓶并放置在暗处。

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  • 三人行

    第1楼2013/01/15

    是不是灯能量太低造成的。

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  • lww1223

    第2楼2013/01/15

    有可能是样品中的某些组分与目标产物会发生某些反应。

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  • zhx_fs_ln

    第3楼2013/01/15

    应助达人

    加标的样品比没加标的样品峰面积还低不正常,加标是怎么加的,怎么处理的样品有图传上来看看

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  • xiaoyujin

    第4楼2013/01/15

    是不是进样系统有污染啊?有没有进入气泡什么的?

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  • wanglihua_19

    第5楼2013/01/16

    我用的是waters2475检测器,开始我也怀疑灯能量低,可仪器工程师说灯能量低会影响基线,会对毎针都用影响,而不是随着进样的进行产生影响,哪位有不同意见

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  • wanglihua_19

    第10楼2013/01/16

    有可能是样品中的某些组分与目标产物会发生某些反应。加标的样品比没加标的样品峰面积还低不正常,加标是怎么加的,怎么处理的样品有图传上来看看,这两个疑问都不成立,先是我自己处理样品在waters仪器上做,结果如我提问的一样,后来同事处理样品,同时在agilent1260仪器上进样,agilent1260仪器上进样完全正常,waters仪器上结果还是如我提问的一样,肯定是仪器的问题,就是不知是哪的问答;系统要有污染,进气泡啥的,压力也不会正常吧,再说先进四点标样都正常的,曲线也还可以啊

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  • vip_pis

    第11楼2013/01/16

    系统有污染的话,只要不是堵得厉害,对压力的影响不大。有可能是检测器的流通池脏了吧。
    也有可能是进样系统有漏液,阀切换不准确。不知道你用的是2695还是2795还是单独的自动进样器。

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  • wy1518

    第12楼2013/01/16

    把你做的放到安捷伦上正常了?柱子和各个条件一样吗?都一样那可能是进样有问题 注意看看压力是否正常

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  • nixiaolong

    第14楼2013/01/17

    两台仪器的柱子一样吗? 灯能量如何? 两台仪器的对标准品响应如何? 如果加标回收很低,有没有尝试加大加标浓度? 标准品进样的精密度如何?

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  • 爱涂涂

    第15楼2013/01/17

    是进样器有污染或是进去气泡了吧,有没有重复进样试试?或者是加大进样量,以减少因为浓度低带来的误差,这样也好查找原因。

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