顺丁烯二酸的测定

国标用的流动相是什么？找到飘的原因了吗？

流动相用的是十六烷基三甲基溴化铵磷酸盐缓冲溶液：乙腈（80:20），十六烷基三甲基溴化铵好像是一种表面活性剂，可能是它的原因，因为水相中不加它的话，基线很好，但不加又不出峰。

应助达人

C18（ODS）柱吗？ 不加 CTAB 的话，不是不出峰，是不保留、死时间出峰吧？

做离子对色谱法，流动相的平衡时间要长一些。如果不是走梯度的话，把流动相手动混合均匀（记得要脱气），走单通道单泵，柱温控制住，应该基线会好一些。没做过离子对色谱法，只是有一些了解，仅供参考。

这位老师，您好，现在基线可以了，但是峰的保留时间波动很大，使用同样的流动相但每天的出峰时间都不一样，是柱子没有平衡好吗，我用1ml/min平衡一个小时，而且流动相都是每天新配。

应助达人

每一天的保留时间不同的原因有可能在于“流动相都是每天新配”。由于称量和量取误差，每天新配的流动相不可能一模一样，总是有或多或少的差异（离子对试剂和缓冲盐的浓度、有机相与水相的比例，pH等）。

另外一个可能性是：样品中的某些组分对色谱柱有一些影响，比如强保留组分的吸附，也有可能导致保留时间和色谱峰形的改变。如果是这样，可以试试对色谱柱进行冲洗和再生（注意：一定要按照色谱柱的说明书进行操作，否则可能导致色谱柱的快速损坏）。

只要色谱峰形正常，塔板数、分离度符合要求，并且同一个样品连续重复进样的保留时间和峰面积都足够稳定就可以，没必要强求每一天的出峰时间一成不变。举一个极端的例子——假设因为某种原因更换了新的色谱柱，保留时间十有八九与更换色谱柱之前是不一样的。

请问楼主，你们有用内标吗？

附件是用YMC色谱柱分离喷鼻药物中顺丁二烯酸（马来酸 Maleic acid）等的色谱图，请参考。

没有用内标

我们用安捷伦的C18柱走过类似的流动相条件，但没走出来，现在我的方法基本摸索出来了，还是谢谢这位老师。