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比较弱的问题:死时间这样算肯定错了?请帮忙解释

  • liushao911
    2014/12/23
  • 私聊

液相色谱(LC)

  • 按照一般的理论 样品峰要在死时间的3倍时间以后出现较好

    我有这么一个试验:流速0.5ml/min色谱柱4.6*150mm 进样口到检测器之间的距离为500mm

    那死时间应该是死体积除以流速的结果:

    V0=3.14*2.3*2.3*150/1000+350*1.59*1.59*3.14/1000≈5.3ml

    T0=5.3/0.5=10.6???

    我的一个峰2分钟多一点就出来了 岂不是毫无可取之处?

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  • dywzqbx

    第1楼2014/12/23

    应助达人

    确实是错了,错的很远。
    死体积的计算:
    (1)色谱柱的死体积V=0.1*L=0.1*15=1.5 ml。
    0.1*L是5um填料的经验公式。
    色谱柱内径为4.6mm,内部是有填料的,占了绝大部分体积,自然是不能按照你那样算的。
    (2)进样器到检测器之间管路体积:进样到检测器之间的管路很细,就是为了减小死体积的,内径好像是0.2~0.3mm之间(记不太清楚,可以自己去查查),绝对不会是3.18 mm内径,你可以去确认下。这一段的体积与色谱柱相比基本是可以忽略不计的。
    此外,计算只是理论值,与实际实验结果有差距是很正常的。

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  • liushao911

    第2楼2014/12/24

    这样的话 死时间应该是3min,我是不是应该考虑降低一个峰延迟到3min以后出现?

    dywzqbx(dywzqbx) 发表:确实是错了,错的很远。
    死体积的计算:
    (1)色谱柱的死体积V=0.1*L=0.1*15=1.5 ml。
    0.1*L是5um填料的经验公式。
    色谱柱内径为4.6mm,内部是有填料的,占了绝大部分体积,自然是不能按照你那样算的。
    (2)进样器到检测器之间管路体积:进样到检测器之间的管路很细,就是为了减小死体积的,内径好像是0.2~0.3mm之间(记不太清楚,可以自己去查查),绝对不会是3.18 mm内径,你可以去确认下。这一段的体积与色谱柱相比基本是可以忽略不计的。
    此外,计算只是理论值,与实际实验结果有差距是很正常的。

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  • 小不董

    第3楼2014/12/24

    应助达人

    管路内径肯定不是1.59mm,一楼的也说了色谱柱内大部分也被填料填充了,所以你的算法是有问题的。
    0.5ml/min的速度,死体积在2-3min应该算正常。

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  • 支点

    第4楼2014/12/24

    应助达人

    柱子里填满了填料,死体积是填料间的空隙和管路的容积。一般进样是有溶剂峰,溶剂峰的出现时间可以认为是死时间。再乘以流速得到相应的死体积。

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  • 夏天的雪

    第5楼2014/12/24

    应助达人

    找一不保留物质,如尿嘧啶等测试死时间,然后乘以流速就是死体积,该死体积是系统加上色谱柱的死体积,现在的系统死体积都很小,可以忽略

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  • liushao911

    第6楼2014/12/24

    你的意思就是由此物质的出峰时间作为判定吧

    夏天的雪(bingwang228) 发表:找一不保留物质,如尿嘧啶等测试死时间,然后乘以流速就是死体积,该死体积是系统加上色谱柱的死体积,现在的系统死体积都很小,可以忽略

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  • dywzqbx

    第7楼2014/12/25

    应助达人

    计算所得始终只是理论值,实际运用中还是会用溶剂峰的出峰时间作为死时间

    liushao911(v2865837) 发表:这样的话 死时间应该是3min,我是不是应该考虑降低一个峰延迟到3min以后出现?

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  • 夏天的雪

    第8楼2014/12/25

    应助达人

    是的,约等于死时间

    liushao911(v2865837) 发表:你的意思就是由此物质的出峰时间作为判定吧

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  • flyaway

    第9楼2014/12/26

    一般用在色谱上用没有保留的化合物测定死时间/死体积吧,溶剂峰的影响因素太多,形状、出峰时间也可能会变化。

    dywzqbx(dywzqbx) 发表:计算所得始终只是理论值,实际运用中还是会用溶剂峰的出峰时间作为死时间

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  • liufeilzu

    第10楼2014/12/26

    楼主用的是色谱柱,不是一根根钢管,你算柱子的死体积明显偏大

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