液相色谱升压原因与处理

液相色谱流动相压力升高之原因与处理

• 在化学分析工作中，应该有不少同仁会遇到异常的“自然”现象——大批量做多组分的化合物分析时做着做着系统反馈流动相压力升高了，目标峰的保留时间改变了延迟了。（我感觉这流动相压力怎么比中午室外的温度升得还要快要高，然后就想去南极冷静冷静了……这样才感觉到目标峰的保留时间延长得不比炎热的夏天漫长）然后就开始寻找仪器是不是哪里出问题了，是不是色谱柱可以“寿终正寝”了，甚至觉得物质的峰保留时间不一样了延迟了——这还是我检测的物质么是不是样品里根本就没有这个目标成份呀。于是，各种纠结各种怀疑……
• 那么，这流动相压力会改变的会升高的，目标峰的保留时间也会改变的也会延迟了，是不是检测的方法是错的了要不要重新再开发和确认检测方法呢？然而，这些想法都是错的，因为经过确认了的方法几乎都是正常的没问题的，特别是在长期检测中得到印证了的方法。（小哥、妹子，要坚定立场啊，自信和淡定才是王道，正确地分析才是专业啊）
• 通常情况下，主要有两种仪器故障导致流动相压力变化和目标峰保留时间延迟，（单向阀故障：单向阀堵了或者密封性不良）其一如图如下：
• 从上图中，5min到8min流动相压力波动且规律性较强但幅度不是很大，判断此为单向阀密封性不良所致。判断依据是： 1.同样的流动相下，出现压力骤降的现象；2.在一定的时段内仍然出现压力波动的现象，但其波动幅度较小且规律性极强；3.增加流速后，流动相压力升高不明显或幅度较小；
• 造成上图中流动相压力波动的有两种主要原因：一是有微粒杂质阻碍单向阀宝石珠的单向密封效果，二是盐流动相转换冲色谱柱时未完全冲净盐，换上纯有机相后有盐结晶析出影响单向阀宝石珠的单向密封效果。二者之中皆可以通过拆换单向阀消除其影响，而后者还可以甲醇:水=10:90的流动相长时间来冲洗和消除单向阀密封性不良的影响；
• 另一种导致流动相压力变化和目标峰保留时间延迟的因素就是传液系统装置接头发生渗漏,该因素除影响流动相系统压力变化和目标峰保留时间延迟外出现目标峰响应值偏低的现象。
• 好了，言归正传到底所谓何因使得流动相系统压力只升高且伴随着目标峰保留时间延迟，答曰：堵！不错，不用怀疑都是：堵！堵！堵……
• 一般情况下，在检测多组份混合化合物中未经提纯的目标物的时候，单一的流动相未必能达到良好的分离效果而使各物质能够良好地分离与呈现，甚至单一的流动相都不能使混合物中的所有成份完全出现而不驻留在色谱柱中。所以，当存在大量驻留时就会导致色谱柱柱效降低，导致分离效果变慢变差，久之形成堵……如图所示所以，在平常分析中对色谱柱的了解及维护保修必不可少。为能达到或维持色谱柱的性能，色谱柱再生维护不可少做。
• 关于色谱柱引起的故障及其解决方法
• 在反相分配色谱法中，固定相载体上涂布极性较弱或非极性的固定液，而用极性较强的溶剂作流动相。它可用来分离油溶性样品，其洗脱顺序是：极性组分先被洗脱，非极性组分后被洗脱。所以，在要洗脱驻留杂质时应当根据其特性选择冲洗方法或溶剂，避免对色谱柱造成损伤或冲洗效果佳等。
• 在液固色谱中，选择流动相的基本原则是极性大的试样用极性较强的流动相，极性小的则用低极性的流动相。流动相有极性强度可用溶剂强度参数ξ表示。ξ是指每单位面积吸附表面的溶液的吸附能力，ξ越大表明流动相的极性越大。如以氧化铝上的洗脱序列：。故而，在反相分配色谱中使用的流动相类似于液固色谱中使用非极性吸附剂时应用的流动相。此时流动相的主体为水，可加入一定量的改性剂，如二甲基亚砜、乙二醇、乙腈、甲醇、丙酮、乙醇、四氢呋喃、异丙醇等，以达到良好的色谱分离效果或防止色谱柱杂质驻留异常。
• 针对化学分析工作所遇到几项色谱柱异常的原因总结以及解决方法，虽然不是很高深的理论，但实际应用中可有更深入了了解和体会。希望写原创能对各位同仁有用……