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同一根C18 30*250mm半制备柱在甲醇体系和乙腈体系测出来差异非常大是怎么回事?

  • xiaobao_ly
    2016/11/16
  • 私聊

液相色谱(LC)

  • 各位大神,这是困扰了我们很久的一个问题,希望大家多多传授经验,万分感谢!
    问题一:
    我们有一根30*250mm的半制备柱,C18 10微米填料,在乙腈/水体系(65/35)下测试柱效能在4万左右,但在甲醇/水体系(85/15)下测柱效只能达到1万多~2万多N/m范围内,我们用的是甲苯作为标品进行的测试,请问出现这种情况的可能原因是什么?
    问题二:
    还有一根20*250mm的半制备柱,C18 10微米填料,我们公司有两套制备液相,这根柱子在这两套设备上测出来的柱效差异非常大(同是纯甲醇体系,以芴为标品,柱效大概差了有1万多N/m),包括拖尾因子差异也比较大,请问这可能是什么原因导致的呢?
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  • 辰夕

    第1楼2016/11/16

    问题一:柱效一定是在规定的色谱条件下测得的,不同的色谱条件柱效当然是不同的。
    问题二:不要用制备液相去测柱效,这个意义不大,除非是专门用于测柱效的设备。半制备柱就用普通液相去测就好了

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  • 有水有渝

    第2楼2016/11/16

    应助达人

    如楼上所言,柱效要在相同条件下去比较,用制备型液相测柱效低可能与较大的死体积有关。

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  • xiaobao_ly

    第3楼2016/11/16

    老师,您好,可能我没把问题讲清楚,这样说吧,同一根柱子,相同检测体系(流动相和配比都一样),我们在A设备上测出来柱效是5万N/m,但在B设备检测柱效只有3.6万N/m,这么大的差异也是正常的吗?

    辰夕(v3018558) 发表:问题一:柱效一定是在规定的色谱条件下测得的,不同的色谱条件柱效当然是不同的。
    问题二:不要用制备液相去测柱效,这个意义不大,除非是专门用于测柱效的设备。半制备柱就用普通液相去测就好了

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  • xiaobao_ly

    第4楼2016/11/16

    还有,老师,您说的这个普通液相是指什么样的液相?分析液相?能不能举个例子解释一下,谢谢您啦~

    辰夕(v3018558) 发表:问题一:柱效一定是在规定的色谱条件下测得的,不同的色谱条件柱效当然是不同的。
    问题二:不要用制备液相去测柱效,这个意义不大,除非是专门用于测柱效的设备。半制备柱就用普通液相去测就好了

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  • 辰夕

    第5楼2016/11/16

    就是在HPLC上,测半制备色谱柱的柱效,相对准一些。
    对于制备液相来说,分析的能力比较弱,如要还是做分离用。在你的问题二里面,你提到用制备设备来测定,其实不同的制备液相在死体积、流速、进样体积准确度、比例准确度上都可能相差比较大,因为一般制备液相很少用于重现另外一台设备所开发的方法,所以你做两台柱效差别比较大也是正常的。通常换制备液相,就需要重新摸方法,所以比较不同仪器的柱效差别意义不大,这个测下来不同,也就是说相同的色谱柱,在A上用的方法不能再B上用。

    xiaobao_ly(v3161257) 发表: 还有,老师,您说的这个普通液相是指什么样的液相?分析液相?能不能举个例子解释一下,谢谢您啦~

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  • 夏天的雪

    第6楼2016/11/16

    应助达人

    分析柱效还是在分析型的色谱上做比较好,制备色谱与分析色谱功能上还是有区别的,所要求的目的不一样

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  • 飘殇

    第7楼2016/11/17

    这是正常的,不同设备之间的死体积是不同的,死体积越大扩散就越大,扩散越大半峰宽就越大,测出来的柱效就低了。

    xiaobao_ly(v3161257) 发表: 老师,您好,可能我没把问题讲清楚,这样说吧,同一根柱子,相同检测体系(流动相和配比都一样),我们在A设备上测出来柱效是5万N/m,但在B设备检测柱效只有3.6万N/m,这么大的差异也是正常的吗?

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