高效液相色谱仪建标准曲线

应助达人

每次走样建议走下质控样品，如果质控结果在理想范围内，那么曲线可以继续用，具体一条曲线能用多长时间还是要看仪器状态

嗯嗯，谢谢指点

应助达人

严格来说就是每次测样之前都要重新做标准曲线，尤其是外标曲线，样品量大的，在样品中还要加几针标样，药企基本是如此。

应助达人

严格来说是要每次做样就要建曲线的，如果样品和设备都是稳定的，基底污染又不是很大，可以考虑多次用一个表现，只需要在样品中间隔几个样品做一个质控样。看质控状态来判定曲线是继续用还是重做。

应助达人

为了保证检测结果的准确性，每次开机后，都需要做曲线，同时在测样之间（如：每10个样品），需要测质控样品，质控样品的误差满足要求，可继续测样，否则需要重新测曲线。
如果仪器只是作企业内部的实验室，没有过相关的认可，对检测结果的准确性不高，只是筛查相关产品是否满足相关质量标准，曲线不用每次做，但测样之前一定要测质控样，质控样品的误差满足要求实验室内部文件的要求，就可继续测样，如果不满足，重新测工作曲线，再测样。

应助达人

每次进样前都进一个标准工作溶液，浓度选择之前曲线上的某一点，然后对比保留时间和峰面积，如果两者差不多，之前的标准曲线可用，如果两者相差很大，建议重新做标准曲线

应助达人

理论上标准曲线是在每次分析之前都要做的，因为每一次分析时仪器状态都不可能与最近一次分析的状态完全一样，而且仪器中色谱柱和检测器的灯能量都是在不断消耗衰减的，所以肯定会多少有些不同。但是实际操作中，我们不可能每次检测样品都做一次标准曲线，这样工作量太大，所以每个实验室都有自己的规定。我们实验室规定的是一周之内可以用同一个标曲，但是需要在检测之前加入一个标样，分析标样在标曲上的误差，误差在可接受范围内即可使用，否则需要重新做标曲。
但是这种方法也有局限性，因为要考察标曲是否适用，至少需要检测两个点才能确定一条直线，才能知道目前的状态是否和标曲一致，所以上述的单点考察标曲(俗称的外标一点法)是有风险的。
如何规避这种风险？我们需要对外标一点法使用范围进行限定。通常所说的外标一点法，其实也是两点法，因为另一个点是坐标轴的0点，外标一点法默认标曲是过原点，没有截距的，所以一个零点，一个外标点，就可以确定一条曲线，从而和标曲对比。
所以，我们在使用外标一点法来考察标曲是否可用时，需要有个前提，那就是标曲是过原点的。理想状态下，标曲都是过原点的直线，但是由于操作，仪器等误差的存在(例如紫外的背景吸收)，标曲往往很难做出过原点的直线，故在实际应用中，一般会要求截距与斜率的比值小于0.01，即截距/斜率<百分之一，这样可以近似认为标曲过原点，可以使用单点校正考察标曲，否则不可以，需要重新做标曲。
在能够使用单点校正考察标曲的前提下，如果样品量较多，建议每分析5个样品，插入一个质控标样，这样可以在分析的过程用监测仪器状态，考察标曲的适用性。
新手对于标曲基本了解这些，我想就够用了，以后在工作中多多体会，慢慢领悟，再往深的学习，祝好运。

应助达人

原则上每次检测都需要建立一条新的标曲的。
标准我这一般都是过了有效期还没用完，何况建一条标曲花得了多少时间。我就不明白为什么还有这么多人都不愿意每次实验建一条标曲？
当然，工厂里或者大型检测机构，机器连续几天开机检测同一个项目几百份样品，这种情况下建立一条标曲，中间穿插质控样，那也是可以的。