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岛津LA2010测试草酸和丁二酸现有条件下分不开。

Insp_f0659ae7

2019/01/14

液相色谱（LC）

使用的液相机器为岛津LA2010，柱子为安捷伦的T3柱。
使用的条件是20mmol磷酸盐：甲醇=90:10 pH磷酸调节到2.9，流速0.5mL/min，柱温40度，进样量100uL。
我的草酸和丁二酸分不开，出峰时间基本在3min左右。想问问有什么方法能让我的这两个峰分开。谢谢各位大神啦！！！！！
以下时我的几个困惑：
1.pH我之前调到2.5好像也分不开。
2.我降低甲醇的比例也分不开，磷酸盐浓度是否还要提高？以及10%的甲醇比例是否为极限了？因为越跑压力约高，我害怕堵柱子。
3.进样100uL是因为我的样品进10uL会使液相整个基线上漂。
4.我的样品是否出峰太快了？
谢谢各位大神了！！

分
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第1楼2019/01/14

应助达人

嗯。出峰时间是有点快。这个东西有标准方法参考吗？

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lijing320323

第2楼2019/01/14

调整流动相

0

言逊

第3楼2019/01/14

应助达人

我感觉如果你提高甲醇比例，很有可能堵柱子！这个出峰时间偏快，觉得还是柱子选择上要再看看！

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检测老菜鸟

第4楼2019/01/14

应助达人

3min还可以，超过2min，我们一般认为是可以接受。100微的进样量吓到我了，降低进样量，峰能分开吗？

0

zeng1860

第5楼2019/01/14

一看就知道说错了，T3是WATERS公司的，安捷伦是AQ，建议用100% 0.1%磷酸水洗脱，一定能分离。

0

夏天的雪

第6楼2019/01/14

应助达人

食品中许多标准都是进样50或者100的，特别是对于低含量的真菌毒素测定。但是有机酸感觉不用进样这么多，20就差不多了
检测老菜鸟(v3295053) 发表:3min还可以，超过2min，我们一般认为是可以接受。100微的进样量吓到我了，降低进样量，峰能分开吗？

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夏天的雪

第7楼2019/01/14

应助达人

ph2,5和2.9应该对分离度的影响不是很大了，磷酸缓冲盐可以调成100%，用耐水的柱子，用完及时冲洗；3min的出峰时间有点短，但是有些小分子量的出峰就是比较短，不太好分，可以看看离子色谱的方法

0

检测老菜鸟

第8楼2019/01/15

应助达人

100%的缓冲盐我试过，好像很容易堵柱子，用完我用纯水冲30min，下次再用的时候压力还往上飙
夏天的雪(bingwang228) 发表:ph2,5和2.9应该对分离度的影响不是很大了，磷酸缓冲盐可以调成100%，用耐水的柱子，用完及时冲洗；3min的出峰时间有点短，但是有些小分子量的出峰就是比较短，不太好分，可以看看离子色谱的方法

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Insm_4514f503

第9楼2019/01/15

没冲干净呗, 反冲或者增加温度更好溶解盐
检测老菜鸟(v3295053) 发表: 100%的缓冲盐我试过，好像很容易堵柱子，用完我用纯水冲30min，下次再用的时候压力还往上飙

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夏天的雪

第10楼2019/01/15

应助达人

30min肯定是不够的，得多冲冲，我做有机酸一直都是100%的缓冲盐。您用100%缓冲盐的时候能分开吗
检测老菜鸟(v3295053) 发表: 100%的缓冲盐我试过，好像很容易堵柱子，用完我用纯水冲30min，下次再用的时候压力还往上飙

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