应助达人
要看看你的柱子是什么规格的,注意流速,还有就是你的柱子里面的保存溶剂,最好用柱子中的保存溶剂先冲柱子,你的这个柱子是不是时间比较久了,一直没有用,要考虑是不是有干涸的可能,建议冲洗程序如下(假设你的柱子是:4.6*250mm,5um,最佳流速是1ml/min):
1、用柱子保存溶剂0.2ml流速冲洗1晚上,这样很有必要
2、用纯乙腈1ml的流速冲3小时
4、用过渡流动相冲洗柱子1ml的流速1小时(过渡流动相:有机相和水的比例与流动相的比例一直,不含盐和离子对试剂)
5、上流动相平衡柱子,上样