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液相色谱(LC)
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【实战宝典】液相色谱分析食品中脱氢乙酸为何不出峰?
小官人
2021/03/23
私聊
液相色谱(LC)
问题描述:
按照国标
GB5009.121-2016
方法,以
0.02mol/L
乙酸铵:甲醇(
V/V
)
=90+10
,流速
1mL/min
,可以检测脱氢乙酸,但在流动相中加入
0.1%
的乙酸后,同样的分析时间内却检测不到脱氢乙酸色谱峰,这是为什么?
解答:
(
1
)脱氢乙酸是我国允许在食品生产加工中使用的一种化学合成防腐剂,在较高的
pH
范围内保持良好的抗菌性。脱氢乙酸是极性化合物,因其含有双键具有紫外吸收,在
C
18
色谱柱有一定的吸附保留。在
GB 5009.121-2016
《食品安全国家标准
食品中脱氢乙酸的测定》
液相色谱
法中使用
0.02mol/L
乙酸铵:甲醇(
V/V
)
=90
:
10
作为流动相,对脱氢乙酸作等度洗脱。
(
2
)通常可电离化合物而言,不同状的化合物态与
C
18
之间的作用力存在明显差异。脱氢乙酸
p
Ka
值为
5.27
,而
0.02mol/L
乙酸铵:甲醇(
V/V
)
=90
:
10
流动相体系的
pH
值在
7~8
,在此体系中,大部分脱氢乙酸处于离子态。当原有体系中加入乙酸酸化后,流动相体系的
pH
值有利于脱氢乙酸从离子态向中性态转化,从而促使脱氢乙酸与
C
18
的作用力更强了,因此,相对而言,乙酸铵:甲醇(
V/V
)
=90
:
10
流动相洗脱能力变弱了,导致脱氢乙酸在
C
18
色谱柱上的保留时间更长,或长期保留在色谱柱上。只有延长酸化后流动相的洗脱时间,或增加酸化后流动相中有机相的比例,可将脱氢乙酸从色谱柱中洗脱出来。
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