开发酸性化合物分析方法，流动相pH要低于待测物pKa，待测物在反相中才以中性化合物存在
增加保留措施：（序号就是优先级顺序）
1.运行纯水相，需要能耐100%纯水，耐pH2以下的色谱柱，比如T3
2.HILIC模式：反反相。
水相为洗脱相，有机相为保留相。有机相的占比不能少于40%。
离子形态才能在该模式下实现保留。
3.离子对试剂：使用四丁基氢氧化铵等
案例1：
开发检测原料的方法
原料结构如下
Column | Waters Atlantis T3 (4.6*150mm,3um) | ||
Wavelength | 228 nm | ||
Column Temperature | 40°C | ||
Column Flow | 1.0 mL/min | ||
Acquisition Time | 15 min | ||
Post Time | 6 min | ||
Injection Volume | 3 μL | ||
Mobile Phase A | Water (0.1%H3PO4, v/v) | ||
Mobile Phase B | ACN | ||
Gradient Program | Time (min) | A% | B% |
0.00 | 95 | 5 | |
3.0 | 95 | 5 | |
8.0 | 20 | 80 | |
10 | 20 | 80 | |
10.1 | 95 | 5 | |
15.0 | 95 | 5 | |
原料RT2.76min，分离，保留及峰形都符合要求。
案例二：
开发吡啶酸的方法
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